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关于α葡萄糖苷酶抑制活性的实验
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aj2003
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[交流]
关于α葡萄糖苷酶抑制活性的实验
最近做一个中药的α葡萄糖苷酶抑制活性的实验,先做了一下空白对照,想摸索一下条件,实验如下,0.1M的磷酸盐缓冲液(pH6.8)60微升,α葡萄糖苷酶(1U/mL)20微升,37度孵育10min,加入pNPG(10mM/L)20微升,37度反应10min后加入30微升0.1M的Na2CO3终止反应,放置室温,405nm下测定吸光度,结果,吸光度很低,0.05左右。我试图加大酶的量,可是还是0.05左右。后来,我把pNPG的浓度提高到30mM时(事实上已经有很多不溶解了),吸光度达到0.2。我看文献中用5mM或10mM的pNPG的居多,现在不知道我的问题出在哪里,有没有做过这个实验的请指导一下,多谢了,金币多多送。另外,α葡萄糖苷酶的活力怎么测定。谢谢了
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2012-03-30 09:06:40
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aj2003
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2楼
2012-03-30 09:59:37
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千里草dwn
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我也是这个情况,上个月做的预实验吸光值还0.5左右,现在几乎没有吸光值了,看看别人的帖子会不会是酶的问题啊~~~
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傻人有傻福
3楼
2014-08-07 14:00:09
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傻人有傻福
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3楼
:
Originally posted by
千里草dwn
at 2014-08-07 14:00:09
我也是这个情况,上个月做的预实验吸光值还0.5左右,现在几乎没有吸光值了,看看别人的帖子会不会是酶的问题啊~~~
楼主找到解决的办法了吗
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4楼
2021-10-18 19:25:32
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2021-12-25 11:26:31
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6楼
2022-05-21 15:13:35
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