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[交流]
关于α葡萄糖苷酶抑制活性的实验
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| 最近做一个中药的α葡萄糖苷酶抑制活性的实验，先做了一下空白对照，想摸索一下条件，实验如下，0.1M的磷酸盐缓冲液（pH6.8）60微升，α葡萄糖苷酶（1U/mL）20微升，37度孵育10min，加入pNPG(10mM/L)20微升，37度反应10min后加入30微升0.1M的Na2CO3终止反应，放置室温，405nm下测定吸光度，结果，吸光度很低，0.05左右。我试图加大酶的量，可是还是0.05左右。后来，我把pNPG的浓度提高到30mM时（事实上已经有很多不溶解了），吸光度达到0.2。我看文献中用5mM或10mM的pNPG的居多，现在不知道我的问题出在哪里，有没有做过这个实验的请指导一下，多谢了，金币多多送。另外，α葡萄糖苷酶的活力怎么测定。谢谢了 |
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