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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 单细胞凝胶电泳
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姜传军

金虫 (小有名气)

[求助] 单细胞凝胶电泳

单细胞凝胶电泳中裂解液的作用是什么？省去这一步会有什么后果？望高手指点
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风逝
1楼 2012-03-30 08:09:15
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wen1023tao

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+3, BioEPI+1, 谢谢参与 2012-09-11 09:50:54
裂解液是破裂细胞，让里面的DNA释放出来，
碱性裂解液（2.5mol/L NaCl;100mmol/L Na2EDTA;10mmol/L Tris;1%肌氨酸钠），临用前加10%DNMSO，1%Triton X-100
碱性条件下，里面还有Triton或者SDS一些表面活性剂，可以破裂胞膜，从而释放胞内DNA，
如果吗，没加，细胞破裂不了，DNA还在胞内，跑电泳是检测不到什么的，更不用说检测单细胞DNA损伤
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2楼2012-03-30 08:49:26
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a71840584

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2012-09-11 09:50:46
裂解就是破坏细胞膜的，但是文献中也有不需要裂解的，一般都是植物的用机械分离法分析细胞核的就都没裂解这一个步骤，我看文献有特别说明为啥裂解不裂解，但是我忘了那篇了，我现在也不记得为啥机械分离的不需要裂解了，反正好多文献都支持机械分离法不需要裂解
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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
3楼2012-09-11 08:57:58
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