24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1760  |  回复: 25
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

欢仔

银虫 (正式写手)

[求助] 引物退火温度

大家好 我自己设计引物,引物合成单上的温度是63.8度 和 55.41度,在PCR扩增时我的退火温度怎么设计呢,是这两个温度的平均温度吗
回复此楼
勇于尝试新鲜事物
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hmily890404

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励 2012-03-28 10:29:25
可以用53℃到63℃做梯度PCR噢~然后跑电泳看哪条带最亮,最亮的就是最适温度了~~
12楼2012-03-27 16:14:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 26 个回答

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我一般先用低的温度作为Tm扩增,不行的话,再做梯度,不过一般只要引物没问题,选择低的那个都能扩出来。
Thank-you,so-blue.
3楼2012-03-26 16:38:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

欢仔

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-03-26 16:37:48:
嗯...............
首先,不要看引物单子的Tm值,引物单子Tm值是有条件的,比如Na离子浓度等。
然后,你拿什么软件设计的引物,就按那个软件给出你的Tm值来设定退火

这么做有效果没,我软件给出的温度相差有点大
勇于尝试新鲜事物
4楼2012-03-26 17:03:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

欢仔

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by susizheng at 2012-03-26 16:38:18:
我一般先用低的温度作为Tm扩增,不行的话,再做梯度,不过一般只要引物没问题,选择低的那个都能扩出来。

哦……我试试吧,如果试了好几个温度,都出不来,是不是就说明引物有问题
还有个问题  电泳可以检测CDNA的好坏吗? 我做了,但是不知道结果是什么意思
勇于尝试新鲜事物
5楼2012-03-26 17:05:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +6 张zz111 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by 左的岸
[考研] 266分求材料化工冶金矿业等专业的调剂 +4 哇呼哼呼哼 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:02 by zhyzzh
[考研] 07化学280分求调剂 +10 722865 2026-03-23 10/500 2026-03-27 15:51 by Plutoqq
[考研] 317求调剂 +5 十闲wx 2026-03-24 5/250 2026-03-27 13:48 by 杨杨杨紫
[考研] 348求调剂 +4 小懒虫不懒了 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:47 by 果果妈咪
[考研] 一志愿郑大085600,310分求调剂 +5 李潇可 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:14 by 不吃魚的貓
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 275求调剂 +10 Micky11223 2026-03-25 12/600 2026-03-27 09:41 by caszguilin
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +5 SYA! 2026-03-23 5/250 2026-03-27 09:29 by 不吃魚的貓
[考研] 材料调剂 +8 匹克i 2026-03-23 8/400 2026-03-27 08:11 by hypershenger
[考研] 一志愿郑州大学,080500学硕,总分317分求调剂 +4 举个栗子oi 2026-03-24 5/250 2026-03-26 23:15 by 不吃魚的貓
[考研] 总分293求调剂 +6 加一一九 2026-03-25 8/400 2026-03-26 13:30 by yujianx
[考研] 打过很多竞赛,085406控制工程300分,求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。,。,。,。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 300求调剂,材料科学英一数二 +5 leaflight 2026-03-24 5/250 2026-03-24 16:25 by laoshidan
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见