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zhoulir7

新虫 (初入文坛)

[求助] 小分子 分离 透析 过柱

各位虫友,大家好!我想请教大家一个问题:我目前在分离一种发酵液中的一种具有抗果蔬褐变效果的物质,到目前为止我确定了,1.此物质耐热性良好,2.此物质经透析后确定为500以下的小分子物质,3.经紫外扫描在264nm处有很强的吸收峰,4.经定性鉴定其中含有酚类,氨基酸,有机酸,黄酮类,糖类等物质。接下来不知道该怎么做,过柱子的话选什么柱子好,请大家帮帮忙,万分感谢!
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhoulir7: 金币+5, 有帮助 2012-03-27 15:05:12
试试c18能不能分开,不能的话就接着做凝胶过滤。
2楼2012-03-26 22:49:25
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斗心

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhoulir7: 金币+5, 有帮助 2012-03-27 15:05:24
还要进一步分离开再做分析吧,要不然直接上C18的话,杂峰很多的,糖类没有吸收峰,要用示差。
3楼2012-03-26 23:48:32
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zhoulir7

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 斗心 at 2012-03-26 23:48:32:
还要进一步分离开再做分析吧,要不然直接上C18的话,杂峰很多的,糖类没有吸收峰,要用示差。

谢谢,你说的C18是制备型高效液相色谱吗?我们这边没有这种仪器,只有分析型的。如果要进一步分离,过凝胶柱怎么样?还有把样蒸干后做一下气质可以吗?
4楼2012-03-27 15:02:10
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zhoulir7

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-03-26 22:49:25:
试试c18能不能分开,不能的话就接着做凝胶过滤。

谢谢,凝胶过滤的话,用什么型号的比较好呢?这种未知物质的分离,资料很少,我查了下凝胶柱有好几个型号,不知道哪个合适点?
5楼2012-03-27 15:04:23
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

不知道你是想做层析呢,还是要做高效液相的凝胶柱
6楼2012-03-27 18:26:27
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zhoulir7

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-03-27 18:26:27:
不知道你是想做层析呢,还是要做高效液相的凝胶柱

想做柱层析,不知道选哪个型号的
7楼2012-03-27 19:08:36
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

可以试试G-15,这个分离的都是分子量在700一下的,不知道你的目的蛋白和杂蛋白的分子量差别大不大,柱子尽量选择比较长的吧。
8楼2012-03-27 19:13:59
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zhoulir7

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-03-27 19:13:59:
可以试试G-15,这个分离的都是分子量在700一下的,不知道你的目的蛋白和杂蛋白的分子量差别大不大,柱子尽量选择比较长的吧。

谢谢了,不过我的是未知物质,我也不知道是不是蛋白,还是其他的像小肽、黄酮或有机酸类
9楼2012-03-27 19:45:17
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

引用回帖:
9楼: Originally posted by zhoulir7 at 2012-03-27 19:45:17:
谢谢了,不过我的是未知物质,我也不知道是不是蛋白,还是其他的像小肽、黄酮或有机酸类

G-15主要是用来脱盐,去除酶的小分子,分离分子量接近的小分子,肽等
10楼2012-03-27 22:24:58
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