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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教在细胞悬液中让细胞失活但使细胞膜不崩解的方法
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mangguolala

新虫 (小有名气)

[交流] 请教在细胞悬液中让细胞失活但使细胞膜不崩解的方法

我想用失活的细胞做该种活细胞的对照来进行该细胞某种生化反应的研究。我的体系是HEPES缓冲液，请教大家能有什么物理或化学方法既能使细胞失活又能保持其完整的细胞形态（大约保持3小时）。同时又不给整个体系引入新的物质（或能除去）。
诚求教，欢迎大家与我讨论实现的方法，或是给我否定该想法的理由。
谢谢~
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1楼 2012-03-19 10:50:11
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mangguolala

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ken126 at 2012-03-19 15:18:12:
应该不会了，但操作要小心，最好在低温进行，去除后尽快将实验结束，不要放置太长时间。

不过用1%多聚甲醛，70%乙醇处理多长时间比较合适呢，是在培养基中加入还是在细胞悬液中呢~
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7楼2012-03-19 19:35:02
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ken126

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
mangguolala(金币+1): 谢谢参与
telomerase: 金币+2, 欢迎新虫！！！谢谢你的热心应助！！ 2012-03-20 09:25:37
mangguolala: 金币+10, 谢谢交流！ 2012-04-05 20:22:09
可以用1%多聚甲醛，70%乙醇；
不过使用后蛋白失去活性，不知是否楼主需要的结果。
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2楼2012-03-19 11:07:36
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mangguolala

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ken126 at 2012-03-19 11:07:36:
可以用1%多聚甲醛，70%乙醇；
不过使用后蛋白失去活性，不知是否楼主需要的结果。

非常感谢回复，正是需要使蛋白失活。请问这样处理后如果用离心清洗的方法去除缓冲体系中的多聚甲醛和乙醇，细胞形态会遭到破坏吗？
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3楼2012-03-19 15:11:33
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ken126

新虫 (小有名气)
★ ★
mangguolala(金币+1): 谢谢参与
telomerase: 金币+1, 谢谢你的热心应助 2012-03-19 16:51:15
应该不会了，但操作要小心，最好在低温进行，去除后尽快将实验结束，不要放置太长时间。
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4楼2012-03-19 15:18:12
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从头开始11楼
2012-03-20 09:20   回复  
mangguolala(金币+1): 谢谢参与
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