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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教在细胞悬液中让细胞失活但使细胞膜不崩解的方法
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mangguolala

新虫 (小有名气)

[交流] 请教在细胞悬液中让细胞失活但使细胞膜不崩解的方法

我想用失活的细胞做该种活细胞的对照来进行该细胞某种生化反应的研究。我的体系是HEPES缓冲液，请教大家能有什么物理或化学方法既能使细胞失活又能保持其完整的细胞形态（大约保持3小时）。同时又不给整个体系引入新的物质（或能除去）。
诚求教，欢迎大家与我讨论实现的方法，或是给我否定该想法的理由。
谢谢~
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1楼2012-03-19 10:50:11
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ken126

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
mangguolala(金币+1): 谢谢参与
telomerase: 金币+2, 欢迎新虫！！！谢谢你的热心应助！！ 2012-03-20 09:25:37
mangguolala: 金币+10, 谢谢交流！ 2012-04-05 20:22:09
可以用1%多聚甲醛，70%乙醇；
不过使用后蛋白失去活性，不知是否楼主需要的结果。
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2楼2012-03-19 11:07:36
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mangguolala

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ken126 at 2012-03-19 11:07:36:
可以用1%多聚甲醛，70%乙醇；
不过使用后蛋白失去活性，不知是否楼主需要的结果。

非常感谢回复，正是需要使蛋白失活。请问这样处理后如果用离心清洗的方法去除缓冲体系中的多聚甲醛和乙醇，细胞形态会遭到破坏吗？
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3楼2012-03-19 15:11:33
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ken126

新虫 (小有名气)
★ ★
mangguolala(金币+1): 谢谢参与
telomerase: 金币+1, 谢谢你的热心应助 2012-03-19 16:51:15
应该不会了，但操作要小心，最好在低温进行，去除后尽快将实验结束，不要放置太长时间。
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4楼2012-03-19 15:18:12
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alqfren

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
mangguolala(金币+1): 谢谢参与
看天: 金币+2, 鼓励交流 2012-03-20 15:23:04
加热会破坏细胞结构吗？
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5楼2012-03-19 16:04:50
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mangguolala

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by alqfren at 2012-03-19 16:04:50:
加热会破坏细胞结构吗？

谢谢讨论，不太清楚，不过加热应该会使细胞膜破坏细胞质会溶出吧~
我有想过用超声，不知有没有依据~
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6楼2012-03-19 19:32:32
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mangguolala

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ken126 at 2012-03-19 15:18:12:
应该不会了，但操作要小心，最好在低温进行，去除后尽快将实验结束，不要放置太长时间。

不过用1%多聚甲醛，70%乙醇处理多长时间比较合适呢，是在培养基中加入还是在细胞悬液中呢~
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7楼2012-03-19 19:35:02
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alqfren

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
mangguolala(金币+1): 谢谢参与
telomerase: 金币+2, 欢迎多多交流！ 2012-03-20 09:24:21
mangguolala: 金币+6, 谢谢交流~ 2012-04-05 20:22:46
引用回帖:
6楼: Originally posted by mangguolala at 2012-03-19 19:32:32:
谢谢讨论，不太清楚，不过加热应该会使细胞膜破坏细胞质会溶出吧~
我有想过用超声，不知有没有依据~

超声恐怕不行吧，很多时候实验室破碎细胞会用超声。
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8楼2012-03-20 08:54:26
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mangguolala

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by alqfren at 2012-03-20 08:54:26:
超声恐怕不行吧，很多时候实验室破碎细胞会用超声。

谢谢，了解了~
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9楼2012-03-20 09:15:49
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mangguolala

新虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by youfengling at 2012-03-20 09:24:00:

同胞们啊，不带这样的啊~只拿金币却不与我交流，我这就剩刷屏了，体谅一下我实验做不出来想跟大家交流的心情吧~
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14楼2012-03-20 17:08:35
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mangguolala

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 从头开始 at 2012-03-20 09:20:24:

同胞们啊，不带这样的啊~只拿金币却不与我交流，我这就剩刷屏了，体谅一下我实验做不出来想跟大家交流的心情吧~
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15楼2012-03-20 17:08:44
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从头开始

荣誉版主 (文坛精英)
引用回帖:
15楼: Originally posted by mangguolala at 2012-03-20 17:08:44:
同胞们啊，不带这样的啊~只拿金币却不与我交流，我这就剩刷屏了，体谅一下我实验做不出来想跟大家交流的心情吧~

sorry没看到
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16楼2012-03-20 17:30:10
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从头开始10楼
2012-03-20 09:20   回复  
mangguolala(金币+1): 谢谢参与
从头开始11楼
2012-03-20 09:20   回复  
mangguolala(金币+1): 谢谢参与
youfengling12楼
2012-03-20 09:23   回复  
mangguolala(金币+1): 谢谢参与
youfengling13楼
2012-03-20 09:24   回复  
mangguolala(金币+1): 谢谢参与
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