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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助，用LCMS做蛋白修饰位点分析
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dshlove

木虫 (正式写手)

[交流] 求助，用LCMS做蛋白修饰位点分析

最近想做蛋白的修饰位点分析。只有LCMC仪器还有分析软件。现在想知道该买些什么酶，具体怎么操作。有没有什么参考文献可以提供。新虫，金币很少。大家将就着点。
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1楼 2012-03-15 09:23:35
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狐狸尾巴

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
自己去查找相关文献就可以了，英文看不懂就中文
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2楼2012-03-15 15:31:02
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dshlove

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 狐狸尾巴 at 2012-03-15 15:31:02:
自己去查找相关文献就可以了，英文看不懂就中文

我要是能找到还来这里求助？
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3楼2012-03-15 23:53:51
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啊Q精神

木虫 (小有名气)
★ ★
dshlove: 金币+1 2012-03-16 12:28:01
telomerase: 金币+1, 谢谢你的热心应助 2012-03-17 15:46:50
希望有帮助！
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  • 附件 1 : [蛋白质的修饰].pdf
    • 2012-03-16 08:54:02, 4.56 M
4楼2012-03-16 08:54:19
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sspxiaoji

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
dshlove: 金币+1 2012-03-16 12:28:10
硬件肯定够了。一般把修饰的纯化出来和未修饰的进行酶切，做个肽图对比就能大致确定，如果有MS那更好。请问你的理论修饰位点在哪里？
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5楼2012-03-16 10:55:34
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dshlove

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 啊Q精神 at 2012-03-16 08:54:19:
希望有帮助！

谢谢
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6楼2012-03-16 12:27:40
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dshlove

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by sspxiaoji at 2012-03-16 10:55:34:
硬件肯定够了。一般把修饰的纯化出来和未修饰的进行酶切，做个肽图对比就能大致确定，如果有MS那更好。请问你的理论修饰位点在哪里？

我也不是很清楚。酶是要看修饰位点再决定的吗？
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7楼2012-03-16 12:29:26
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啊Q精神

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
dshlove: 金币+1 2012-03-16 23:25:24
你修饰的目的是什么？提高稳定性还是活性？
不同的修饰方法，部位都是不一样的。多找找与酶和修饰相关的文献看看。
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8楼2012-03-16 17:30:17
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rinp

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
dshlove: 金币+1 2012-03-16 23:27:42
什么叫最近想做啊，姐做磷酸化4年了，你以为很简单啊~~
LC-MS-MS要看是什么级别的，orbitrap或者FTICR还行，一般的 可能检测不到或者比别人报道的差很多哦（我只知道磷酸化哈）
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9楼2012-03-16 20:32:14
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dshlove

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 啊Q精神 at 2012-03-16 17:30:17:
你修饰的目的是什么？提高稳定性还是活性？
不同的修饰方法，部位都是不一样的。多找找与酶和修饰相关的文献看看。

就是检测修饰位点啊，什么甲基化，乙酰化，糖基化之类的。怎么利用MS还有通过酶切来确定，被修饰的位点。有点类似于测序了
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10楼2012-03-16 23:24:53
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dshlove

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 啊Q精神 at 2012-03-16 17:30:17:
你修饰的目的是什么？提高稳定性还是活性？
不同的修饰方法，部位都是不一样的。多找找与酶和修饰相关的文献看看。

你又什么文献推荐么？感激不尽！
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11楼2012-03-16 23:25:20
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dshlove

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by rinp at 2012-03-16 20:32:14:
什么叫最近想做啊，姐做磷酸化4年了，你以为很简单啊~~
LC-MS-MS要看是什么级别的，orbitrap或者FTICR还行，一般的 可能检测不到或者比别人报道的差很多哦（我只知道磷酸化哈）

妹子，不要这么凶巴巴的。
我也知道不简单，我还要做泛素化，乙酰化，糖基化。我只是想确定修饰的位点，不知用什么方法。你做磷酸化这么久，有没有点经验之谈啊。
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12楼2012-03-16 23:27:38
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