24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 938  |  回复: 2
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hongdou83917065

铁虫 (初入文坛)

[交流] 阳性克隆的扩大培养长不出菌 已有2人参与

挑取单克隆,对经过菌落pcr筛选阳性的克隆摇菌扩大培养,可是摇了20h菌液还是澄清的。
载体PET32
插入片段2000bp
感受态 DH5α
培养温度37度180转
培养基,平板均没有问题
做了几次都这样快疯了,帮帮忙吧!
回复此楼
耶和华是我的牧者
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

karin

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5): 给个红包,谢谢回帖
考虑重新做一次转化吧。我以前也遇到过这种情况,很急人,各种培养条件换了又换,就是不行,不清楚什么原因。后来重新做了一次转化、筛选,就顺利了。祝好运!
坚持就是胜利
3楼2012-03-14 09:34:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

酶切专家

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5): 给个红包,谢谢回帖
送鲜花一朵
西瓜(金币+1): 鼓励下 2012-03-13 23:55:38
可能是你克隆的基因(或者表达产物)对E.coli有很强的毒性,事实上,这种情况很常见。我建议你在培养基中加葡萄糖至终浓度5%,应该能解决你的问题。
2楼2012-03-13 20:17:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 070300化学279求调剂 +9 哈哈哈^_^ 2026-03-31 11/550 2026-03-31 20:32 by sophie2180
[考研] 086000调剂 +5 7901117076 2026-03-26 5/250 2026-03-31 17:45 by 544594351
[考研] 0710生物学求调剂! +5 叙述文 2026-03-31 5/250 2026-03-31 17:32 by 唐沐儿
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +6 hanamiko 2026-03-29 6/300 2026-03-31 16:35 by hypershenger
[考研] 物理学调剂 +4 小羊36 2026-03-30 4/200 2026-03-31 16:16 by lishahe
[考研] 085601 329分调剂 +6 yzsa12 2026-03-31 6/300 2026-03-31 15:23 by yanflower7133
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +6 Ong3 2026-03-27 6/300 2026-03-31 15:18 by yanflower7133
[考研] 一志愿中国科学院大学265求调剂 +6 恬淡ye 2026-03-31 7/350 2026-03-31 11:28 by 恬淡ye
[考研] 调剂求院校招收 +7 鹤鲸鸽 2026-03-28 7/350 2026-03-31 11:21 by oooqiao
[考研] 320分,材料与化工专业,求调剂 +10 一定上岸aaa 2026-03-27 14/700 2026-03-31 10:47 by foria
[考研] 274求调剂 +6 xiao爱同学 2026-03-30 6/300 2026-03-31 10:04 by cal0306
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 21:07 by peike
[考研] 各位老师好,我的一志愿为北京科技大学085601材料专硕 +10 Koxui 2026-03-28 10/500 2026-03-30 19:33 by 源_2020
[考研] 0703一志愿9,初试成绩:338,四六级已过,有科研经历,求调剂! +7 Zuhui0306 2026-03-25 7/350 2026-03-30 19:01 by 源_2020
[考研] 329求调剂 +8 星野? 2026-03-26 8/400 2026-03-30 13:41 by chemdavid
[考研] 332求调剂 +6 Lyy930824@ 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:53 by 1172367218
[考研] 352分-085602-一志愿985 +5 海纳百川Ly 2026-03-29 5/250 2026-03-29 09:57 by Sjndkwm
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-28 16:19 by xxxsssccc
[考研] 材料求调剂 +5 .m.. 2026-03-25 5/250 2026-03-27 11:08 by 不吃魚的貓
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315(英一)求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
信息提示
请填处理意见