应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 阳性克隆的扩大培养长不出菌
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
31/1返回列表
查看: 940  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hongdou83917065

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[交流] 阳性克隆的扩大培养长不出菌 已有2人参与

挑取单克隆，对经过菌落pcr筛选阳性的克隆摇菌扩大培养，可是摇了20h菌液还是澄清的。
载体PET32
插入片段2000bp
感受态 DH5α
培养温度37度180转
培养基，平板均没有问题
做了几次都这样快疯了，帮帮忙吧！
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

酶切专家

» 猜你喜欢
耶和华是我的牧者
1楼 2012-03-13 19:57:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

酶切专家

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★ ★
小木虫(金币+0.5): 给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
西瓜(金币+1): 鼓励下 2012-03-13 23:55:38
可能是你克隆的基因（或者表达产物）对E.coli有很强的毒性，事实上，这种情况很常见。我建议你在培养基中加葡萄糖至终浓度5%，应该能解决你的问题。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-03-13 20:17:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

karin

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★
小木虫(金币+0.5): 给个红包，谢谢回帖
考虑重新做一次转化吧。我以前也遇到过这种情况，很急人，各种培养条件换了又换，就是不行，不清楚什么原因。后来重新做了一次转化、筛选，就顺利了。祝好运！
赞一下(1人) 回复此楼
坚持就是胜利
3楼2012-03-14 09:34:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hongdou83917065 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂：一志愿：南京大学 专业：0705 总分320 ，本科985，四六级已过 +3 lfy760306 2026-03-31 3/150 2026-04-01 01:57 by Creta
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +19 洛神哥哥 2026-03-31 19/950 2026-04-01 01:35 by 1018329917
[考研] 一志愿西交大080500材料学硕349 +6 jqx1258 2026-03-31 7/350 2026-03-31 21:08 by yuq
[考研] 一志愿北京科技大学材料学硕328分求调剂 +4 1段时间 2026-03-31 5/250 2026-03-31 19:56 by wxiongid
[考研] 本2一志愿C9-333分，材料科学与工程，求调剂 +9 升升不降 2026-03-31 9/450 2026-03-31 18:01 by 无际的草原
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +20 Mr. Z 2026-03-25 21/1050 2026-03-31 16:53 by Zzxxxs
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +6 hanamiko 2026-03-29 6/300 2026-03-31 16:35 by hypershenger
[考研] 289求调剂 +3 Acesczlo 2026-03-29 4/200 2026-03-31 14:48 by 热情沙漠
[考研] 286求调剂 +6 Faune 2026-03-30 6/300 2026-03-31 14:37 by jp9609
[考研] 土木304求调剂 +4 兔突突突， 2026-03-31 5/250 2026-03-31 11:29 by 北风之神.
[考研] 一志愿中国科学院大学265求调剂 +6 恬淡ye 2026-03-31 7/350 2026-03-31 11:28 by 恬淡ye
[考研] 313求调剂 +6 卖个关子吧 2026-03-31 6/300 2026-03-31 10:58 by Jaylen.
[考研] 083000环境科学与工程调剂，总分281 +4 橙子（胜意） 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +11 麻辣鱿鱼 2026-03-27 12/600 2026-03-30 19:33 by Wang200018
[考研] 327求调剂 +5 小卡不卡. 2026-03-29 5/250 2026-03-30 19:30 by Wang200018
[考研] 085701求调剂初试286分 +5 secret0328 2026-03-28 5/250 2026-03-30 12:54 by fangnagu
[考研] 一志愿郑大085600，310分求调剂 +5 李潇可 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:14 by 不吃魚的貓
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 一志愿 南京邮电大学 288分 材料考研 求调剂 +3 jl0720 2026-03-26 3/150 2026-03-26 13:39 by zzll406
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭