24小时热门版块排行榜    

查看: 3006  |  回复: 41
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

mahoumeimei

金虫 (小有名气)

[求助] RNA电泳

各位,我的RNA电泳结果很差,是降解了吗?(最左边是生工的100bp DNA ladder)我是刚提完就跑的电泳,是提取过程中操作不当吗?

RNA电泳
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励交流。RNA没提出来也是很可能的。 2012-03-14 22:29:58
mahoumeimei: 金币+1 2012-03-27 11:28:51
首先,环境样本里面的RNA抽提对于材料的预处理很重要,要确保能够分离完整的环境样品RNA
其次,几乎可以肯定,你的琼脂糖电泳里面含有大量的RNase,而且,一般大家都用的TAE/TBE,电泳时间太长了;100%降解!
第三,更清晰的条带需要用尿素胶或者甲醛胶。

Good luck~
致良知
10楼2012-03-13 08:37:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 42 个回答

karin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
mahoumeimei(金币+2): 2012-03-12 20:05:20
你提取的RNA量太低而且降解严重。正常RNA电泳应该有28s、18s、5s三条带,28s的带的亮度约是18s带的两倍,最低也得等同,一般提取情况下5s的带很少见。你的RNA基本都降解了,建议认真彻底处理提取用具及环境!
坚持就是胜利
2楼2012-03-12 12:29:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mahoumeimei

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by karin at 2012-03-12 12:29:14:
你提取的RNA量太低而且降解严重。正常RNA电泳应该有28s、18s、5s三条带,28s的带的亮度约是18s带的两倍,最低也得等同,一般提取情况下5s的带很少见。你的RNA基本都降解了,建议认真彻底处理提取用具及环境!

我提取用的枪头是买的一次性的,实验台和移液枪都喷了酒精了,实验过程中都带着口罩和干净手套,求教还有哪里可能没注意到啊?急!急!急!
3楼2012-03-12 15:00:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

karin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小丹木木(金币+2): 鼓励 2012-03-13 10:30:25
mahoumeimei: 金币+1 2012-03-27 11:28:42
引用回帖:
3楼: Originally posted by mahoumeimei at 2012-03-12 15:00:57:
我提取用的枪头是买的一次性的,实验台和移液枪都喷了酒精了,实验过程中都带着口罩和干净手套,求教还有哪里可能没注意到啊?急!急!急!

跑电泳的东西也是要处理的。我以前是用试剂盒提取的,所用的管子和枪头也都是买的去RNase的,把制胶的模具和电泳槽用DEPC处理,提取过程尽量迅速,效果还是不错的。你是提取的甚么的RNA呢?
    祝实验成功!
坚持就是胜利
4楼2012-03-12 17:08:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +3 gouxfjh 2026-08-28 3/150 2026-08-29 01:01 by jurkat.1640
[基金申请] 国自然评审意见 +11 wangmingqi 2026-08-28 15/750 2026-08-29 00:17 by fangyl2005
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +8 苏东坡二世 2026-08-23 8/400 2026-08-28 14:41 by lkforward
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +4 gdd2018 2026-08-28 9/450 2026-08-28 14:22 by jklily
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +3 bud_bud 2026-08-27 6/300 2026-08-28 11:53 by bud_bud
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
信息提示
请填处理意见