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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 信号分子
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jamy1989

木虫 (小有名气)

[求助] 信号分子

现在从链霉菌中表达出了一种调控蛋白并提纯了，通过验证这种调控蛋白能和基因 D结合，结合后能调节该菌株次级代谢产物的产生，但这种结合必须是在加培养液上清的条件下！所以上清中必然存在着某种信号分子，那么，现在要找到这种信号分子有什么好的方法吗？
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qwdr
1楼 2012-03-10 10:37:29
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
★ ★ ★ ★
西瓜: 金币+4, Good！ 2012-05-20 18:37:25
"第二种“高通量”的话，因为这个信号分子本身就是很微观的东西！很难提取出来！可能是一个多肽，可能是一些无机离子等....可否有别的方法呢？"你怎么知道很难提出来！？从蛋白质等大分子中去除掉金属离子或类似分子量的小分子用什么办法？？-----------最简单的用Millipore超滤离心管装上培养剂溶液上离心机进行离心，只不过，你把Millipore超滤离心管底部甩出的液体不要扔掉，做个原子光谱分析和红外光谱，根据特征光谱大致可以判明有哪些常见的物质，然后用超滤的培养剂溶液适当稀释后，再培养细胞看看反应，还可以把Millipore超滤离心管底部甩出的液体加回培养基看细胞的反应。
这步无效，用成分差别大的培养基培养细胞，看看目的信号超导是否出现，对比两者成分。
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15楼2012-05-19 20:51:54
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
帮顶下~
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2楼2012-03-17 14:35:23
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a731705125

银虫 (小有名气)
★
西瓜: 金币+1, 鼓励交流！ 2012-03-17 15:13:15
貌似不好弄，要不然血清的成分应该早就搞清了吧。
这个信号分子是不是应该很小，把上清液的层份是不是先分析下，如果东西少的话还好，东西太多就不好搞吧。
蛋白质相互作用的一系列东西能用在这里么？
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3楼2012-03-17 14:56:16
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jamy1989

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by a731705125 at 2012-03-17 14:56:16:
貌似不好弄，要不然血清的成分应该早就搞清了吧。
这个信号分子是不是应该很小，把上清液的层份是不是先分析下，如果东西少的话还好，东西太多就不好搞吧。
蛋白质相互作用的一系列东西能用在这里么？

肯定很小啊！上清的成分光化合物就有一百多种，加上蛋白和多肽更多了，想想可不可以用分子生物学的手段来得到？？！！！
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qwdr
4楼2012-03-17 21:59:09
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