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shushen_jian

金虫 (正式写手)


[求助] 外标法选择理想波长!

想用外标定量!请大家帮我选择一个合适的波长,谢谢大家!
其中一个是黑线代表原料,另一个红线代表是产物!



[ Last edited by shushen_jian on 2012-3-9 at 20:53 ]
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zhrmghgmn

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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shushen_jian(金币+5): 有帮助 2012-03-10 10:00:12
原料和产物均需定量,选择220nm,只定量产物就选250nm。
2楼2012-03-10 08:53:11
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xxaijwd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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shushen_jian(金币+5): 2012-03-10 10:00:24
如果是液相,并且流动相里含甲醇个人建议同时定量的话250nm吧,因为230以下甲醇会有干扰的,乙腈的话可以考虑产物220附近那个峰值的波长,单纯定量产物的话建议使用300nm 以上那个吸收波长。

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3楼2012-03-10 09:48:44
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panshi3000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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shushen_jian(金币+5): 2012-03-10 10:00:31
soundhorizo(金币+1): 鼓励应助,欢迎常来分析版指导交流 ^^ 2012-03-10 10:33:39
我想如果你要监控反应程度的话,建议你选用高效液相色谱法,先分离,在定量,这样就不叫准确了,这时候波长的选择可以根据DAD检测数据来定。我不知道你扫面这个溶液的浓度是多少,不过偏高了,A要控制在0.3——0.8之间,定量效果才会好。同时定量药学选波谱一介倒数为零的点。所以建议测定产物,在300——350nm之间的最大吸收波长。原料建议在200——250nm之间的最大吸收波长处。同时考虑到紫外仪器发出波长的波动,最好不要选择紫外峰较尖锐的地方,以为波长的略微改变会使结果变化比较大。
如果采用色谱法,监控产物的话,需要加上校正因子(一点法校正、标准曲线法校正等,请参看相关资料),这样比较准确,这时候波长可以设置在产物200——250nm之间的最大吸收波长。
4楼2012-03-10 09:49:39
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shushen_jian

金虫 (正式写手)


送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by xxaijwd at 2012-03-10 09:48:44:
如果是液相,并且流动相里含甲醇个人建议同时定量的话250nm吧,因为230以下甲醇会有干扰的,乙腈的话可以考虑产物220附近那个峰值的波长,单纯定量产物的话建议使用300nm 以上那个吸收波长。

首先对你们的帮助表示感谢,我是用高效液相来定量分析,而且两个物质同时定量,那么如果用250nm作为检测波长,两个物质的响应值会相差很大,这样用外标法配制样品的浓度是不是不好做呢?
5楼2012-03-10 10:24:51
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xxaijwd

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by shushen_jian at 2012-03-10 10:24:51:
首先对你们的帮助表示感谢,我是用高效液相来定量分析,而且两个物质同时定量,那么如果用250nm作为检测波长,两个物质的响应值会相差很大,这样用外标法配制样品的浓度是不是不好做呢?

这也是要考虑的问题之一,这种情况因为二者波长差太多,一般都要加校正因子的,二者浓度肯定不能同样配制了。不过校正因子因为我没做过,不知道具体怎么实施的,这个不好乱说的……
6楼2012-03-10 10:29:49
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