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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 96孔板中培养大肠杆菌怎么直接破碎？
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yingq1

木虫 (小有名气)

[求助] 96孔板中培养大肠杆菌怎么直接破碎？ 已有1人参与

在96孔板中摇起来的大肠杆菌怎么在96孔板内直接破碎菌体？用来测胞内酶活的被困扰好多天了，实验一直不能开展，希望高手支招！！！
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1楼 2012-03-08 17:28:52
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

看天

木虫 (知名作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yingq1 at 2012-03-08 18:33:46:
额~貌似没有这种方法的文献

那应该只能用破壁酶了吧 你是厌氧菌
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
4楼2012-03-08 18:35:09
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普通回帖

看天

木虫 (知名作家)
看文献里面的method
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
2楼2012-03-08 18:21:48
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yingq1

木虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by 看天 at 2012-03-08 18:21:48:
看文献里面的method

额~貌似没有这种方法的文献
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3楼2012-03-08 18:33:46
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yingq1

木虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by 看天 at 2012-03-08 18:35:09:
那应该只能用破壁酶了吧 你是厌氧菌

不知道溶菌酶之类的东西对我要测的胞内酶有没有影响啊？
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5楼2012-03-08 19:54:36
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yingq1(金币+2): ★★★很有帮助 之前试过，效果不好啊，反复冻融后测不到酶活，不知道您关于这方法有什么建议 2012-03-09 08:58:45
反复冻融，反复冻融，反复冻融，反复冻融，
四个字回帖还不可以
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6楼2012-03-09 08:21:45
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

检测不到酶活是浓度太低还是变性，你这个具体情况我也不是很清楚
有没有其它检测方法，先确定有没有目标产物，再确定是否变性
我想，你的溶液内容物浓度应该挺高，不会是变性的事。
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7楼2012-03-09 09:47:09
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yingq1

木虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by lzgxgz at 2012-03-09 09:47:09:
检测不到酶活是浓度太低还是变性，你这个具体情况我也不是很清楚
有没有其它检测方法，先确定有没有目标产物，再确定是否变性
我想，你的溶液内容物浓度应该挺高，不会是变性的事。

因为要大量筛，用96孔板冻融的所以菌液量比较少，同批次菌液拿去超声破碎是有酶活的。。。
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8楼2012-03-09 16:59:37
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wenzi6337

木虫 (著名写手)
超声破碎
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9楼2012-03-10 17:59:20
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yingq1

木虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by wenzi6337 at 2012-03-10 17:59:20:
超声破碎

....还有能破碎96孔板的超声破碎仪吗？求赐教
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10楼2012-03-10 18:28:11
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