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yingq1

木虫 (小有名气)

[求助] 96孔板中培养大肠杆菌怎么直接破碎?已有1人参与

在96孔板中摇起来的大肠杆菌怎么在96孔板内直接破碎菌体?用来测胞内酶活的被困扰好多天了,实验一直不能开展,希望高手支招!!!
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看天

木虫 (知名作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yingq1 at 2012-03-08 18:33:46:
额~貌似没有这种方法的文献

那应该只能用破壁酶了吧 你是厌氧菌
戒嗔怒以养肝气,省言语以养神气,多读书以养质气,顺时令以养元气,不拘节以养大气,观天变以养灵气,莫强求规于运气。
4楼2012-03-08 18:35:09
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普通回帖

看天

木虫 (知名作家)

看文献里面的method
戒嗔怒以养肝气,省言语以养神气,多读书以养质气,顺时令以养元气,不拘节以养大气,观天变以养灵气,莫强求规于运气。
2楼2012-03-08 18:21:48
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yingq1

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 看天 at 2012-03-08 18:21:48:
看文献里面的method

额~貌似没有这种方法的文献
3楼2012-03-08 18:33:46
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yingq1

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 看天 at 2012-03-08 18:35:09:
那应该只能用破壁酶了吧 你是厌氧菌

不知道溶菌酶之类的东西对我要测的胞内酶有没有影响啊?
5楼2012-03-08 19:54:36
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yingq1(金币+2): ★★★很有帮助 之前试过,效果不好啊,反复冻融后测不到酶活,不知道您关于这方法有什么建议 2012-03-09 08:58:45
反复冻融,反复冻融,反复冻融,反复冻融,
四个字回帖还不可以
6楼2012-03-09 08:21:45
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

检测不到酶活是浓度太低还是变性,你这个具体情况我也不是很清楚
有没有其它检测方法,先确定有没有目标产物,再确定是否变性
我想,你的溶液内容物浓度应该挺高,不会是变性的事。
7楼2012-03-09 09:47:09
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yingq1

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by lzgxgz at 2012-03-09 09:47:09:
检测不到酶活是浓度太低还是变性,你这个具体情况我也不是很清楚
有没有其它检测方法,先确定有没有目标产物,再确定是否变性
我想,你的溶液内容物浓度应该挺高,不会是变性的事。

因为要大量筛,用96孔板冻融的所以菌液量比较少,同批次菌液拿去超声破碎是有酶活的。。。
8楼2012-03-09 16:59:37
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wenzi6337

木虫 (著名写手)

超声破碎
9楼2012-03-10 17:59:20
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yingq1

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by wenzi6337 at 2012-03-10 17:59:20:
超声破碎

....还有能破碎96孔板的超声破碎仪吗?求赐教
10楼2012-03-10 18:28:11
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