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myz162

新虫 (初入文坛)

[交流] 聚丙烯酰胺凝胶电泳中同样的PCR产物为何会出现不同条带 已有4人参与

Sample Text共有几个PCR产物,在第一次进行凝胶电泳时条带有差异,其中有单带的,也有多带的。后来,想回收条带,再跑时,结果却是这几个产物不再出现差异。后来,又用这些产物多跑了几次,结果又出现开始那种差异了。所以,我疑惑的是:第二次跑时为什么会没有差异?
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tco_001

新虫 (小有名气)

产物被分解了吧
2楼2012-03-05 22:20:38
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怎么都行

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
LZ是做的变性胶吗?变性剂分布不均匀就有可能出现这问题。
3楼2012-03-05 23:28:11
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myz162

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by tco_001 at 2012-03-05 22:20:38:
产物被分解了吧

应该不是产物分解,因为后来又可以了!
4楼2012-03-07 14:57:55
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myz162

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by 怎么都行 at 2012-03-05 23:28:11:
LZ是做的变性胶吗?变性剂分布不均匀就有可能出现这问题。

使用的是非变性胶。开始我也怀疑是因为胶分布不均造成的,但是同样的做法做了2次,结果都是这3个样没差异,但是其他的是有差异的。(这3个样是我跑板时帮别人带的,结果我的样的条带是有差异的,但是他的没有。)第三次时才出现开始的差异现象,所以应该不是样的问题。
5楼2012-03-07 15:04:14
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sunwei57

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
最好放上图,非变性胶电泳时当条带不单一时,会出现二聚体,如果条带多情况就复杂了
6楼2012-03-28 11:40:46
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永远一片天

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主想问你一下,DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳与琼脂糖凝胶电泳的设备是不是不一样的?DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳与蛋白质的设备是一样的吗?银染方法也一样吗?聚丙烯酰胺与琼脂糖灵敏度差别很大吗?
7楼2014-11-17 18:25:35
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