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shjdyb

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于药物体外二相代谢研究

求助:我现在在做一种药物的体外代谢研究,体内以证明其代谢产物是葡糖醛酸结合和硫酸结合代谢产物,现在在做体外实验,一直做不出代谢现象,请求大家帮助。

我的孵育体系是100μL:按文献方法葡糖醛酸体系:微粒体0.1mg/mL, 5mM Mgcl2, 0.03%曲拉通,0.5mM药物,孵育5min后,3mMUDPGA启动反应,孵育60min.
硫酸体系是使用的肝胞质液,其他条件同上(未加曲拉通),PAPS启动反应。
     实验非常着急,谢谢大家的帮助。
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luodi911

铁虫 (小有名气)

微粒体浓度可能太低了,因为你没法保证你做的活性好不好
以前我做的时候,就是把微粒体提取之后立刻加底物之类的孵育,先不测浓度,浓度测定和孵育同时进行,最后测得大概有3~4mg/ml的样子。估计还是微粒体活性不好吧
6楼2012-03-12 10:25:17
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