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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 6%变性聚丙烯酰胺凝胶总是凝的不好 求指点 急啊 谢谢了
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wskxbxf

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by zhangyiz at 2012-03-01 17:08:48:
我想存在以下几个方面的问题
1、你购买的药品有没有问题（所涉及的每一种药品）
2、你配的胶的浓度有没有问题
3、聚合温度是多少（温度低的话，聚合时间较长，一般室温较好）
4、如果药品没问题的话，适当加大 ...

恩 非常感谢您的分析 应该不是药品的问题 因为刚开始的时候 还好 可能就是APS放的时间太久了 谢谢您
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31楼2012-03-02 14:07:20
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wskxbxf

新虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by 九庄湖 at 2012-03-01 17:08:49:
我也遇到过这样的问题，多加了些AP就好了。我看分子克隆上是每次用都要现配现用

好的 知道了 我试试 谢谢了 我可能就是APS时间太久了 都好几个月了
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32楼2012-03-02 14:07:55
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wskxbxf

新虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by zhangsiju at 2012-03-02 12:33:11:
放到烘箱里面，40-50℃，我就是这样解决的，纠结了好长时间。

谢谢您的指点
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33楼2012-03-02 14:08:25
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新虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by cashfox at 2012-03-02 13:50:18:
过夜的话，有没有用被电泳液（新配）浸湿的纱布覆盖？

哦 没有 别人做过 他们都没盖 效果还行 可能是我的APS的问题
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34楼2012-03-02 14:09:41
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yanhua_2006

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
聚丙烯酰胺凝胶的配制过程中，温度和光照强度都会影响交联速度和交联质量，你可以适当提高交联温度，放在恒温培养箱中，另外，有光线的地方交联要好很多，但是最好是太阳光，比较均一。人为的光照不均匀可能会造成交联不均匀
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35楼2012-03-02 15:02:23
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zhhard

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
加大AP的量，这里注意的时TEMD的量 不要加的太多，要不胶的韧性不好，容易碎！不希望做拼图游戏的就加大AP的量吧，230微升以上
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36楼2012-03-02 15:17:49
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wskxbxf

新虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by yanhua_2006 at 2012-03-02 15:02:23:
聚丙烯酰胺凝胶的配制过程中，温度和光照强度都会影响交联速度和交联质量，你可以适当提高交联温度，放在恒温培养箱中，另外，有光线的地方交联要好很多，但是最好是太阳光，比较均一。人为的光照不均匀可能会造成 ...

谢谢您
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37楼2012-03-06 18:40:19
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wskxbxf

新虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by zhhard at 2012-03-02 15:17:49:
加大AP的量，这里注意的时TEMD的量 不要加的太多，要不胶的韧性不好，容易碎！不希望做拼图游戏的就加大AP的量吧，230微升以上

恩 同意 谢谢
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38楼2012-03-06 18:40:26
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tianzhanwei

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
加大TEMED的量加到50ul
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天道酬勤
39楼2013-10-18 20:02:25
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qapollo

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
63ulTEMED,135ul10%APS，这个量大约10到15分钟就能凝结。如果凝不上就尝试适当加量，一定不要加热。加热会增加凝集速度、降低凝胶质量，而且会增加水分蒸发造成凝胶收缩。APS配置好之后冻在-20就行，一年都没问题，短期使用放到4度就行。你的胶能凝上就说明药品问题不大，尝试改一下配方就好。

[ Last edited by qapollo on 2013-10-18 at 21:29 ]
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40楼2013-10-18 21:26:40
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