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~春梦秋云~

金虫 (小有名气)

[求助] ABA对拟南芥突变体发芽及生长的影响的试验该如何设计?

拟南芥突变体有若干种种子,ABA该如何处理,以及需要观测什么指标呢?想知道比较全面的,在此先谢过!
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eagle00768

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
~春梦秋云~(金币+2): ★★★★★最佳答案 2012-02-25 15:36:32
wanhscn(金币+5, MolEPI+1): 根据楼主的反馈,回答很好,决定授予小木虫分子生物版专家指数一枚,以鼓励! 2012-02-25 15:55:02
你可以用不同浓度梯度的ABA处理种子,对比相同浓度不同种子之间的萌发率,然后再看在哪个浓度下效果最好,这个可以先用对应的野生型做一下,确定你最后要用哪几个浓度。具体来说,就是找一些萌发小皿,就是一些塑料的小培养皿,假设你用5个ABA(包括ABA0,也就是对照)梯度,有5个样(包括野生型和突变体),每个样每个浓度至少做3个重复,那么就是75个小皿。小皿中铺上滤纸,加入600微升的ABA处理液,铺上种子,一般60粒左右。然后把这些小皿找个萌发盒放起来,就是带有盖子那种盒子。放在4度3d左右,然后放到人工培养箱大概5-7天拿出来数萌发率。这个就算是ABA处理对种子萌发的影响。至于对生长的影响,一般就是看小苗吧。先把种子铺到MS培养基上,等到统一萌发以后(即在冰箱4度先放3d左右,然后放培养箱或者培养室里3、4d)把小苗移到含不同ABA浓度的MS培养基上,这时要用竖板子,再接着在培养室(或培养箱)培养约1w,期间要注意观察差异,一般指标就是看地上部分和地下部分,也就是真叶的生长状况,有没有出现死亡,底下部分就是测量根长之类的。一般也就这些了吧,不知道这么说是否够详细清楚?
2楼2012-02-25 13:24:01
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~春梦秋云~

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by eagle00768 at 2012-02-25 13:24:01:
你可以用不同浓度梯度的ABA处理种子,对比相同浓度不同种子之间的萌发率,然后再看在哪个浓度下效果最好,这个可以先用对应的野生型做一下,确定你最后要用哪几个浓度。具体来说,就是找一些萌发小皿,就是一些塑 ...

想问下你知道ABA溶液怎么配吗?直接不怎么溶?
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3楼2012-04-11 12:16:25
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