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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » HPLC色谱峰宽、不对称、拖尾怎么办
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daiwei1229

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC色谱峰宽、不对称、拖尾怎么办

我做的是一种酸性药物的色谱分析，查文献的色谱条件是：
柱温：30℃
流速：1
流动相：乙腈：乙酸盐缓冲液（pH4.0）（11：:89）
色谱柱：C18（150*4.6）
进样量：20μL
波长：268
按此条件做出来的峰形很不好，不对称，峰比较宽，而且拖尾，而且峰面积和浓度不成比例。望各位大侠给些意见改进一下


[ Last edited by daiwei1229 on 2012-2-23 at 13:47 ]
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1楼 2012-02-23 13:44:30
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gynl

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

试一下下面几种方法：
1.适当地增加流速
2.管路太长的话也会造成拖尾，你看下你们的仪器管路能不能调了，这一般是工程师帮搞的
3.把柱子冲洗几个钟后再重新进针看看
4.你给出的图谱是按文献的条件做的，我们说文献只能是参考，不说别的，就你的仪器和柱子跟文献上的都有差别，很难做得跟文献一样的，你可以稍微调下流动相，把出峰时间稍稍调前，峰会变宽会变小的
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22楼2012-06-07 14:20:21
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anyluk

主管区长 (文坛精英)

国家高级公共营养师

优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-23 21:15:17
daiwei1229(金币+1): ★有帮助 2012-02-24 17:00:32
换根柱子，再做一次
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精益求精
2楼2012-02-23 14:04:43
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豆哥

主管区长 (职业作家)

制粒能手

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-23 21:15:23
daiwei1229(金币+1): ★★★很有帮助 2012-02-24 17:01:01
1. 可能是柱效不好，换根柱子试试看
2. 加三乙胺，或者调节流动相酸碱度
3. 继续纯化样品
4. 减少进样量
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边学边问，才有学问。
3楼2012-02-23 14:44:18
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-23 21:15:35
daiwei1229(金币+1): ★有帮助 2012-02-24 17:01:20
同意三楼，方法都可行。另外可以试试提高一下柱温40℃，试试看。
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守候在风中的宁静。
4楼2012-02-23 16:11:40
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