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augusten

铁虫 (初入文坛)

[求助] DNA电泳凝胶成像系统条带很宽,都有哪些因素

平板电泳,1×TBE琼脂糖1.2%,有总DNA、50V,也有PCR产物、150V,都是等胶凉了以后先点样再放进电泳槽的。
VL Photo-print 215 SD成像系统。
出的条带都不是很干净的一条线,有点带点“凹”字形,有的就成了“口”字形了(接近点样孔的大小)。
帮忙分析下都可能会有哪些因素

总DNA






口字形
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Biochemical

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
augusten: 金币+1 2012-05-03 17:12:02
augusten: 金币+1 2012-06-04 10:55:28
从Marker条带来看,应该是凝胶成像的问题,调节光圈或焦距试试看
11楼2012-04-19 16:42:55
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augusten

铁虫 (初入文坛)

补充说明一下
植物叶子提取的DNA,第一张没有稀释,第二张稀释的,第三张为PCR后的。
2ul样品+4ul溴酚蓝上样
2楼2012-02-21 17:19:38
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laojiu9878

至尊木虫 (知名作家)

九牛

【答案】应助回帖

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用薄一点的梳子,电流不要太大。
但愿人长久
3楼2012-02-22 09:18:15
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若水5886

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你用的体系是:2ul样品+4ul溴酚蓝上样,溴酚蓝太多咯,这样会造成DNA挂壁的,也就是挂在胶上,跑的时候就容易出现凹陷的形状。loading buffer 一般有6*和10*的,你2ul样品+0.4ul loading buffer 上样就可以了,电压在60-140 v这样的效果都不错的,你可以试试

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4楼2012-02-22 09:54:21
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