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刀有我

金虫 (正式写手)

正在努力瘦身的人

[求助] 荧光猝灭实验中的散射问题

本人刚开始做蛋白荧光猝灭的实验,刚扫了缓冲液(背景)和蛋白的发射光谱,激发波长为280nm,结果在300nm处出现杂峰,遂尝试减小波长至260nm,杂峰也随之蓝移,在背景溶液中也存在相似情况,基本肯定是去离子水的拉曼光干扰,但激发波长无法低于250nm,不知该如何解决拉曼散射干扰的问题,发射光谱图如附件,如果不能换溶剂或减小激发波长,那怎么办。调整滤光片吗?求高人指教

缓冲液280nm



缓冲液260nm



蛋白溶液280nm



蛋白溶液260nm



[ 来自科研家族 木虫环保 ]
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让论文飞一会儿
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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
激发、发射狭缝调的小一点
可能的话加290nm滤光片
2楼2012-02-21 08:57:19
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wodemiss

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以加滤光片,但是我想请问一下你的为什么不能降低激发光波长?我的蛋白扫激发光谱在278nm处和220nm处都有一个比较大的峰,这不符合镜像对称了,请问你知道这是为什么吗?
一蓑烟雨任平生
3楼2012-04-15 11:43:42
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stirfanny

木虫 (正式写手)

用280激发,然后将水的拉曼峰扣除掉应该也可以的。
4楼2012-04-16 19:18:55
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