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lsy568568

新虫 (小有名气)

[求助] 求助:关于冲洗色谱柱的问题

现在方法使用的流动相是乙腈和5mM乙酸铵,请问:冲洗柱子的方法是否还是用乙腈和5mM乙酸铵冲洗?冲洗流速不变,只是时间变长?谢谢!!
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ffxcszx

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用乙腈和水梯度洗脱,90:10到10:90,我用的柱子保存时建议使用65:35的乙腈和水。所以用这个比例再冲20分钟才保存。看一下你柱子的说明。
7楼2012-02-21 11:45:24
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zhrmghgmn

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
试验完毕,应先用水冲洗1小时左右,再用甲醇冲洗。
2楼2012-02-20 08:49:43
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小醇醇

木虫 (正式写手)

攀登者~

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
带缓冲盐的流动相,我一般是先用甲醇:水=10:90冲半小时,然后纯甲醇冲半小时,关机
即使是走过无数次的路,也能走到从未踏足过的地方;正因为是走过无数次的路,景色才会变幻万千
3楼2012-02-20 09:45:57
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
soundhorizo(金币+1): 感谢专业指导。 ^^ 2012-02-21 12:43:26
lsy568568(金币+6): ★★★很有帮助 非常感谢 2012-02-22 08:51:39
既然流动相中含有乙腈,冲柱的时候还是选择乙腈吧(甲醇和乙腈之间选)。因使用了缓冲盐,所以得先用大比例的水相冲洗。可设程序如下:
90:10=水:乙腈  40min(30min以上)
    递变              15min
90:10=乙腈:水  40min(30min以上)
最后用纯乙腈或90%乙腈保存(看说明书要求吧)
守候在风中的宁静。
4楼2012-02-21 08:33:53
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