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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求助：关于冲洗色谱柱的问题
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lsy568568

新虫 (小有名气)

[求助] 求助：关于冲洗色谱柱的问题

现在方法使用的流动相是乙腈和5mM乙酸铵，请问：冲洗柱子的方法是否还是用乙腈和5mM乙酸铵冲洗？冲洗流速不变，只是时间变长？谢谢！！
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1楼2012-02-19 22:04:49
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zhrmghgmn

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试验完毕，应先用水冲洗1小时左右，再用甲醇冲洗。
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2楼2012-02-20 08:49:43
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小醇醇

木虫 (正式写手)

攀登者~

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
带缓冲盐的流动相，我一般是先用甲醇：水=10:90冲半小时，然后纯甲醇冲半小时，关机
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即使是走过无数次的路，也能走到从未踏足过的地方；正因为是走过无数次的路，景色才会变幻万千
3楼2012-02-20 09:45:57
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo(金币+1): 感谢专业指导。 ^^ 2012-02-21 12:43:26
lsy568568(金币+6): ★★★很有帮助 非常感谢 2012-02-22 08:51:39
既然流动相中含有乙腈，冲柱的时候还是选择乙腈吧（甲醇和乙腈之间选）。因使用了缓冲盐，所以得先用大比例的水相冲洗。可设程序如下：
90:10=水：乙腈  40min（30min以上）
    递变              15min
90:10=乙腈：水  40min（30min以上）
最后用纯乙腈或90%乙腈保存（看说明书要求吧）
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守候在风中的宁静。
4楼2012-02-21 08:33:53
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songyuze0319

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-02-21 08:33:53:
既然流动相中含有乙腈，冲柱的时候还是选择乙腈吧（甲醇和乙腈之间选）。因使用了缓冲盐，所以得先用大比例的水相冲洗。可设程序如下：
90:10=水：乙腈  40min（30min以上）
    递变              15min
90:1 ...

四楼正解，只是最后最好不要用纯乙腈冲柱子，而且在做完样后，首先purge下冲泵,可大流速（如3.5mL/min)15min左右，然后再...
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5楼2012-02-21 08:55:38
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ltxin2009

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
尽量别用100%的水冲洗C18柱，耐水柱除外。
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6楼2012-02-21 11:32:00
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ffxcszx

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用乙腈和水梯度洗脱，90:10到10:90，我用的柱子保存时建议使用65:35的乙腈和水。所以用这个比例再冲20分钟才保存。看一下你柱子的说明。
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7楼2012-02-21 11:45:24
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xzjiangzhen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不同柱子要求不同，一般在柱子的说明书里面都有的，如果流动相中含有盐，应该用水和甲醇或者乙腈冲洗，比例为80：20，冲洗20分钟后，然后改变比例为5：95，保存柱子，冲洗十分钟。
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8楼2012-02-21 14:00:21
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wya01

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该先用大比例的水冲，再用纯的有机溶剂冲
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9楼2012-02-21 17:10:16
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lsy568568

新虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-02-21 08:33:53:
既然流动相中含有乙腈，冲柱的时候还是选择乙腈吧（甲醇和乙腈之间选）。因使用了缓冲盐，所以得先用大比例的水相冲洗。可设程序如下：
90:10=水：乙腈  40min（30min以上）
    递变              15min
90:1 ...

还有一个问题不明白， 用纯乙腈或90%乙腈保存柱子是什么意思？我们的柱子一般不取， 如果换下，也是拧上堵头就可以了。不知道保存柱子是怎么回事。望解答，谢谢！！
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10楼2012-02-22 08:55:26
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