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zi_su

铜虫 (正式写手)

[求助] 壳聚糖-明胶支架上看不见培养的细胞?

最近做成了壳聚糖-明胶支架,将细胞种植在支架上之后,用刀片切了薄片之后,在倒置显微镜下看不见细胞,用FDA/PI荧光染色之后也看不到细胞,但是支架下方的培养板里可以看见细胞增长挺快,说明支架对细胞应该没有毒性的。
请问:
1.如何在倒置显微镜下看细胞在支架上的生长?
2.如何染色看细胞在支架上的活性?
多谢各位!有经验的帮助一下哈!
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联想小歪

银虫 (小有名气)

材料不透明,是什么也看不到的。建议用激光共聚焦。
还有,支架材料的孔隙过大的话,细胞是会漏下去的。材料如果亲水性太强,是不利于细胞粘附与增殖的,建议材料上接枝RGD。
验证材料的细胞毒性,还可以用材料的浸提液来做
11楼2018-02-06 11:56:57
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0115402

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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zi_su(金币+2): ★★★很有帮助 2012-02-17 14:24:21
支架都不透明吧,不能用倒置显微镜看到细胞的。用共聚焦显微镜才行。
具体染色要看是什么细胞。
一般细胞是不愿意在支架中生长的,因为支架中缺乏营养物质与氧气,你需要把细胞强制种植在支架中才可以,否则都会跑到培养板上的。
2楼2012-02-17 14:15:26
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zi_su

铜虫 (正式写手)

多谢哈,下次用共聚焦看看 呵呵
3楼2012-02-17 14:25:31
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红舟流星

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【答案】应助回帖

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lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2012-02-18 00:08:38
zi_su(金币+2): 2012-02-19 11:13:24
倒置不就是为了不透明吗?
再说MTT结果好(培养板内细胞生长良好)又不代表细胞一定能贴附支架上
细胞贴附不仅需要材料无毒,还需要一定的表面性质
红楼一梦终难寻扁舟载酒且慢行落花流水依惜别月伴明星照前路
4楼2012-02-17 19:33:38
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