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请问哪位高手用琼脂糖电泳跑过蛋白?
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魏慧芳
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[
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]
请问哪位高手用琼脂糖电泳跑过蛋白?
我用琼脂糖跑蛋白,条带总是拖尾,染色后条带前沿和加样槽之间形成蓝色的一片,长方形,这是为什么呢?还不像正常的拖尾,求高手指教!!!
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1楼
2012-02-08 21:51:24
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kris骞
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6楼
:
Originally posted by
rainblue007
at 2012-02-10 12:25:28
本人跑过两年琼脂糖-蛋白电泳,这种情况,建议调整琼脂糖浓度,还有,电泳液不能加太多,刚刚没过胶面就行了。
你好,我现在也在尝试用琼脂糖跑蛋白,想问问,染色液你用的是考马斯亮蓝吗?一般染多久?
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11楼
2016-12-19 09:56:49
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小丹木木(金币+3): 鼓励应助 2012-02-09 13:35:37
一般使用琼脂糖凝胶电泳的都是DNA,电泳驱动力靠的是DNA骨架本身的负电荷。蛋白质电泳(一般指SDS-PAGE)一般使用的都是聚丙烯酰胺凝胶电泳,电泳的驱动力靠与蛋白质结合的SDS上所携带的负电荷。都是负电荷,所以这两个电泳体系可以互相交换使用。进行大分子蛋白质电泳时,可以考虑换用琼脂糖凝胶,因为该体系孔径大。出现上述情况,是不是因为蛋白不够大根本跑不开?~~
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2楼
2012-02-09 00:16:08
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lixingliang
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注册: 2011-04-03
性别: GG
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
为什么蛋白要用琼脂糖凝胶电泳来跑呢,我们都是用的聚丙烯酰胺凝胶电泳,建议尝试一下
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我不管你看起看不起我,我都是个演员
3楼
2012-02-09 08:01:50
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hxwhu
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专业: 生物大分子结构与功能
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小丹木木(金币+2): 鼓励应助哦 2012-02-10 13:38:29
样品要一样处理哦,加SDS加还原剂,缓冲液不能用TAE吧,要tris-glycine缓冲体系的,总之,感觉很怪,难道你不会做块垂直胶吗,琼脂糖胶那么厚,不好染不好脱
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4楼
2012-02-09 13:54:17
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