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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 请问安捷伦SB-C18新色谱柱第一次使用需要做什么？
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wangshuanghu

金虫 (初入文坛)

[求助] 请问安捷伦SB-C18新色谱柱第一次使用需要做什么？ 已有1人参与

请问安捷伦SB-C18新色谱柱第一次使用需要做什么？

[ 来自科研家族 生物医药家族 ]
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daydayup!
1楼 2012-02-05 14:26:00
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herb_fcwr

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-05 20:12:09
一般先看色谱柱使用说明，上面会明确写明存放、处理方法。
如果没有详细说明，我实验室的做法是先用30%甲醇水洗脱20-30个柱体积
再用甲醇洗脱20-30个柱体积，当然流出液都不进检测器。
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2楼2012-02-05 19:55:14
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shuishangjun

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
50:50甲醇水冲洗个把小时就行了
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天天快乐
3楼2012-02-20 09:14:09
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猪脚楠

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先纯的甲醇或乙腈洗脱半小时，后用30的甲醇洗一个小时就行。
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要做最好的男人
4楼2012-04-25 21:08:52
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谷牛牛

木虫 (著名写手)
wangshuanghu: 回帖置顶 2012-04-26 09:21:17
引用回帖:
4楼: Originally posted by 猪脚楠 at 2012-04-25 21:08:52:
先纯的甲醇或乙腈洗脱半小时，后用30的甲醇洗一个小时就行。

现在的安捷伦的柱子虽然已经没有像以前那样需要活化，但是第一次用柱子的时候，建议还是走一下活化的流程，而且在用后要好好冲下柱子，这是延长柱子的使用寿命很是关键！
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5楼2012-04-25 22:08:28
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417316039

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
新的色谱柱在用来分析药品前，请一定要充分平衡色谱柱，因为对于反相色谱柱（C18柱、C8柱）出厂测试后是保存在乙腈\水中的，在储存或运输过程中会引起键合相空间结构发生变化，因此需要平衡，方法如下：以纯乙腈或甲醇作为流动相，首先用低流速（0.2ml\min）将色谱柱平衡后，将流速增加到0.8ml/min冲洗30分钟，即可以进行样品的分离，如果你所使用的流动相中含有缓冲盐，应注意首先用20倍柱体积的5%乙腈\水流动相过渡，然后用分析样品的流动相直至得到稳定的基线，对于正相柱来说，（NH2柱、氨基柱）则需要更长的时间来平衡，因为这些色谱柱在出厂测试后是保存在正庚烷中。如果极性色谱柱需要使用含水泊流动相，需在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡。
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泪可流，辱可忍，脚步不可停！
6楼2012-04-26 10:52:11
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

看你的色谱柱使用说明书是首要任务，再做下柱效测试
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7楼2012-05-31 08:14:45
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firstcat

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般用甲醇或者乙腈冲30min,基线平稳,无杂质峰就可以使用啦.第一次使用可以选择说明书上的标准品进行柱效测试,看柱子是否达到要求,如果没有相关标准品,也可使用自己的对照品记录柱效,以供以后参照，判断柱效损失.
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8楼2012-07-05 18:02:07
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fxcszx7253

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

新买的C18液相色谱拄用乙腈：水（80：20）流速0.5ml/min冲洗2小时至平恒，再用萘 蒽 菲测定柱效，柱效可以就可以使用了，柱效不行就联系商家换一只。
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9楼2014-04-14 14:40:42
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