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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 诱导前后无明显变化
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seasonxyz

新虫 (小有名气)

[求助] 诱导前后无明显变化

目的蛋白是outer membrane protein C, 载体是 pQE 60, OD600=0.8时加入IPTG，加IPTG前OmpC的带就很深，诱导后与诱导前基本无变化，可能是什么原因呢？需要更换载体吗？还是膜蛋白就是这样的？非常感谢。
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1楼 2012-01-25 06:32:03
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by seasonxyz at 2012-01-29 22:25:51:
但是你的至少能看到表达前后有变化是吗？而且能够纯化出来？

加大表达菌量！
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jiayoubashaonian
5楼2012-01-29 22:33:16
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
seasonxyz(金币+1): 2012-01-29 22:24:27
本来表达就很高的话，可以稀释些再跑胶。表达条件也可以尝试优化下，IPTG浓度、温度这些条件可以做个梯度。过年还做实验，很牛哦！新年快乐~
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2楼2012-01-25 23:45:23
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
西瓜(金币+2, 专家考核): ood！ 2012-01-29 22:28:11
膜蛋白表达很难，要我也在纯化一个三次跨膜蛋白，表达量很低，但还能用，载体是pet28a，多表达些看看能不能够大兔子用的！
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seasonxyz
jiayoubashaonian
3楼2012-01-28 15:29:02
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seasonxyz

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by blackrose8089 at 2012-01-28 15:29:02:
膜蛋白表达很难，要我也在纯化一个三次跨膜蛋白，表达量很低，但还能用，载体是pet28a，多表达些看看能不能够大兔子用的！

但是你的至少能看到表达前后有变化是吗？而且能够纯化出来？
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4楼2012-01-29 22:25:51
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