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lepapillon7

新虫 (小有名气)

[求助] 请教关于enterokinase的问题

新手刚刚学习用pET32系统表达蛋白,后续需用肠激酶切除TRX标签。
请问在最初大肠杆菌裂解时的蛋白酶抑制剂应该用那哪种呢?是不是不能用cocktail或者PMSF了。
此外,若是第一步纯化蛋白用Ni柱纯化,洗脱之后。是直接将蛋白浓缩后,透析到肠激酶反应的的buffer中吗。还是可以直接用浓缩后的蛋白加入到肠激酶反应体系中?
请问哪里有这方面实验详细的介绍吗?
谢谢 不胜感激
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匿名

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2楼2012-01-30 10:29:44
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sxr1268

新虫 (初入文坛)

楼主你的问题解决了没,我也遇到类似的问题,望指导
3楼2014-04-03 14:09:47
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