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请教关于enterokinase的问题
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新手刚刚学习用pET32系统表达蛋白，后续需用肠激酶切除TRX标签。 请问在最初大肠杆菌裂解时的蛋白酶抑制剂应该用那哪种呢？是不是不能用cocktail或者PMSF了。 此外，若是第一步纯化蛋白用Ni柱纯化，洗脱之后。是直接将蛋白浓缩后，透析到肠激酶反应的的buffer中吗。还是可以直接用浓缩后的蛋白加入到肠激酶反应体系中？ 请问哪里有这方面实验详细的介绍吗？ 谢谢 不胜感激 |
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