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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » hplc如何进样合理？
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c402073239

金虫 (正式写手)

[交流] hplc如何进样合理？

色谱法做含量和有关物质是，一般空白、系统适用性、对照品、供试品怎么进样比较合理，每个进几针？
含量：
有关物质：
大家平时都是怎么做的，主要指成品检验。
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1楼 2012-01-16 09:56:03
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wddmq

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
lk590(金币+1): 谢谢参与 2012-01-16 10:56:45
c402073239(金币+1): 谢谢！比较详细！！ 2012-01-16 12:38:25
建议：含量、有关外标法——空白1~2针（主要是显示出基线比较稳定）
                                      系统适应性1针（分离度）
                                      对照品1 5~6针（系统精密度RSD值）
                                      对照品2 1针（回收率）
                                      供试品双样单针/双针
                                      对照品1针（回收率）
         有关自身对照法——空白1~2针（主要是显示出基线比较稳定）
                                   系统适应性1针（分离度）
                                   对照品、供试品双样单针
     以上进样是本公司QC标准，个人认为做研发可以稍微简便一点
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2楼2012-01-16 10:43:38
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839967781

木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
研发比成品检验更复杂
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3楼2012-01-16 12:30:38
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c402073239

金虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by wddmq at 2012-01-16 10:43:38:
建议：含量、有关外标法——空白1~2针（主要是显示出基线比较稳定）
                                      系统适应性1针（分离度）
                                      对照品1 5~6针（系统精密度RSD值） ...

有关自身对照法  系统适用性（一般都是高浓度）进完1针后，如果主峰有残留，对下针有影响，再进低浓度的对照品溶液，导致低浓度的对照主峰面积增大，对杂质结果是肯定会有影响的。个人认为系统适应性、对照后都应该再进空白。
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4楼2012-01-16 12:42:38
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
从头开始(金币+1): 多谢参与 2012-01-16 15:44:08
c402073239(金币+1): 含量对照溶液精密度怎么计算？ 2012-01-16 16:26:06
含量
空白1~2针，系统适用性3针，对照及供试品双样双针。
有关
空白1~2针，供试品及自身对照1针。

我们研发是这样的。。。
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5楼2012-01-16 15:37:11
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sky3d

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
空白一针，梯度的话2针，系统溶液，对照一5针，看进样精密度，对照二2针，看回收率，样品2针，中间要加对照二，看回收率是否合格，
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6楼2012-01-16 19:43:03
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c402073239

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wddmq at 2012-01-16 10:43:38:
建议：含量、有关外标法——空白1~2针（主要是显示出基线比较稳定）
                                      系统适应性1针（分离度）
                                      对照品1 5~6针（系统精密度RSD值） ...

对照品1 5针和 对照品2 1针计算回收率 ？是什么说法？
怎么计算，有什么范围吗？   
本人平时是对照1和对照2，我们这边是算相似因子，范围是0.99-1.01之间，说明对照溶液配制准确。
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7楼2012-01-16 21:39:14
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News

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
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7楼: Originally posted by c402073239 at 2012-01-16 21:39:14:
对照品1 5针和 对照品2 1针计算回收率 ？是什么说法？
怎么计算，有什么范围吗？   
本人平时是对照1和对照2，我们这边是算相似因子，范围是0.99-1.01之间，说明对照溶液配制准确。


我之前也是这样的。5针对照峰面积与2针峰面积之比与2针对照与5针对照称样量之比的乘积。即R=(A5/A2)*(m2/m5)   R在98.0%~102.0%之间则证明称样量是准确的。这种做法申报国内、国外项目都没问题的。                     相似因子是中国药典的一般要求。
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8楼2012-01-16 22:44:20
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News

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by c402073239 at 2012-01-16 12:42:38:
有关自身对照法  系统适用性（一般都是高浓度）进完1针后，如果主峰有残留，对下针有影响，再进低浓度的对照品溶液，导致低浓度的对照主峰面积增大，对杂质结果是肯定会有影响的。个人认为系统适应性、对照后都应 ...

如果存在残留，就说明方法并不是很好。还需改进。
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9楼2012-01-16 22:51:07
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zn19831231

至尊木虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我们一般是进三针
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10楼2012-01-17 07:46:37
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