24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 10676  |  回复: 24
本帖产生 1 个 BioEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)


[交流] 从 单克隆杂交瘤细胞 到 抗体序列(抗体测序)

最近做杂交瘤细胞里PCR出抗体V区序列.
先提RNA,然后用抗体特异的一套引物RT-PCR,目标片段TA克隆,测序。
发现VH的CDR3位置总有终止密码子,请问有人遇到过这个情况吗?

鉴于上提到杂交瘤传代过多、培养过久会“频繁”的出现各种突变,包括插入、点突变、整个序列不对。所以现在问题集中在杂交瘤的亚克隆过程和培养上,不知各位遇到过这种情况没

[ Last edited by gongeleven on 2012-4-20 at 10:56 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mlbiosci

新虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主可否共享下相关资料,比如orotocol啥的,对此很有兴趣

发自小木虫Android客户端
24楼2016-01-22 00:02:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 25 个回答

匿名

用户注销 (正式写手)



gongeleven(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+1): 谢谢参与 2012-02-16 12:55:11
本帖仅楼主可见
2楼2012-01-17 10:01:15
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

whui

至尊木虫 (著名写手)



gongeleven(金币+1):谢谢参与
有可能。
你试一试用oligoDT反转录,用恒定区做下游引物
3楼2012-01-17 15:07:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)


引用回帖:
: Originally posted by whui at 2012-01-17 15:07:40:
有可能。
你试一试用oligoDT反转录,用恒定区做下游引物

我用的是 Qiagen Onestep RT-PCR kit, 引物用的是 Mouse-Ig primer set(Novagen)。而且终止密码子后面的序列还是抗体特征的序列(基因组污染RNA?)。之前做过几十个了也没出现这个问题。
4楼2012-01-18 09:21:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 食品工程专硕求调剂 +3 小张zxy张 2026-03-26 3/150 2026-03-27 01:14 by dgnhs
[考研] 316求调剂 +4 江辞666 2026-03-26 4/200 2026-03-27 00:33 by wxiongid
[考研] 349求调剂 +5 杰斯塔里斯 2026-03-21 5/250 2026-03-27 00:31 by wxiongid
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 321求调剂 +6 Ymlll 2026-03-24 6/300 2026-03-26 20:50 by 不吃魚的貓
[考研] 材料调剂 5+4 想要一壶桃花水 2026-03-25 10/500 2026-03-26 19:56 by 不吃魚的貓
[考研] 281求调剂 +3 亚克西good 2026-03-26 5/250 2026-03-26 19:48 by 不吃魚的貓
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 340求调剂 +3 Amber00 2026-03-26 3/150 2026-03-26 18:57 by 不吃魚的貓
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 274求调剂 +14 顾九笙要谦虚 2026-03-24 20/1000 2026-03-26 18:15 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +4 JKSOIID 2026-03-26 4/200 2026-03-26 15:58 by 不吃魚的貓
[考研] 359求调剂 +3 王了个楠 2026-03-25 3/150 2026-03-25 12:50 by Dyhoer
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
信息提示
请填处理意见