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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 55 (初中生)
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帖子: 432
在线: 152.9小时
虫号: 1082982

[交流] 从单克隆杂交瘤细胞到抗体序列（抗体测序）

最近做杂交瘤细胞里PCR出抗体V区序列.
先提RNA，然后用抗体特异的一套引物RT-PCR，目标片段TA克隆，测序。
发现VH的CDR3位置总有终止密码子，请问有人遇到过这个情况吗？

鉴于上提到杂交瘤传代过多、培养过久会“频繁”的出现各种突变，包括插入、点突变、整个序列不对。所以现在问题集中在杂交瘤的亚克隆过程和培养上，不知各位遇到过这种情况没

[ Last edited by gongeleven on 2012-4-20 at 10:56 ]

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1楼 2012-01-16 09:18:00

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

丁梦娟1993

银虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 1995004

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

20楼: Originally posted by 紫铃清风li at 2015-07-10 11:57:24
不知道楼主这个问题解决了没有,目前我也在做相关方向的研究,根据自己扩增的序列以及结合国内外的文献资料报道,如果在CDR3区域出现终止子,可能是假基因.杂交瘤细胞在融合时,是骨髓瘤细胞和脾细胞融合而来,因此杂交瘤 ...

你好！不知道你能不能看到，还请问一下如果一直出现假基因应该怎么处理啊？

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