24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3218  |  回复: 13

秦川萝卜头

金虫 (小有名气)

[求助] 紫外分光光度计使用波长的确定

大家好,我最近在测脂肪酶的活性,要用对硝基苯酚棕榈酸酯释放的对硝基苯酚的量的多少来确定。我是先用蒸馏水配置了一系列对硝基苯酚浓度(水为参比),来测量吸光值,绘制标准曲线,所选波长是经过扫描了的,317处。而我在测量酶活时,因溶剂不是纯水,还有异丙醇,还有缓冲液,但我空白也用的是这些。为什么在317处测的不是最大值,什么原因啊,请高手指点?谢谢
回复此楼
只要努力,总会有结果的
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
秦川萝卜头(金币+5): 2012-02-02 21:02:07
不清楚你的缓冲pH是多少,如果是偏碱性的,那最大吸收波长必定是红移的,而且吸收强度也大。
由于酚羟基的解离引起,其次是酶的吸收问题!@
3楼2012-01-16 13:25:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

deepwaterh

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
同一种物质在不同溶剂中的最大吸收波长是不一样的,你在绘制标准曲线的时候用的溶液应该和你测酶活的时候的一样
4楼2012-01-16 16:32:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

bobking67310

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道楼主是否在测量时溶液中含有脂肪酶,脂肪酶属于蛋白质,蛋白质在紫外上也会出峰,楼主如果是测对硝基苯酚的含量,是不是考虑参比溶液中加入相应含量的蛋白质,去除背景影响。
2楼2012-01-16 10:14:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秦川萝卜头

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by bobking67310 at 2012-01-16 10:14:10:
不知道楼主是否在测量时溶液中含有脂肪酶,脂肪酶属于蛋白质,蛋白质在紫外上也会出峰,楼主如果是测对硝基苯酚的含量,是不是考虑参比溶液中加入相应含量的蛋白质,去除背景影响。

我的空白里边加的也有脂肪酶!空白跟实验组加的东西一样!
只要努力,总会有结果的
5楼2012-01-16 17:40:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秦川萝卜头

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by chaijudi at 2012-01-16 13:25:38:
不清楚你的缓冲pH是多少,如果是偏碱性的,那最大吸收波长必定是红移的,而且吸收强度也大。
由于酚羟基的解离引起,其次是酶的吸收问题!@

我的PH确实偏碱!那我做对硝基苯酚标准曲线是不是得用我的缓冲溶液配置啊?
只要努力,总会有结果的
6楼2012-01-16 17:42:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秦川萝卜头

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by deepwaterh at 2012-01-16 16:32:08:
同一种物质在不同溶剂中的最大吸收波长是不一样的,你在绘制标准曲线的时候用的溶液应该和你测酶活的时候的一样

假如我用A溶剂配,并且用A溶剂做参比,跟用B溶剂配,B溶剂做参比!在同一波长下测的吸光度一样吗?且最大吸收波长一样吗?谢谢!
只要努力,总会有结果的
7楼2012-01-16 17:47:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

是的!
8楼2012-01-17 08:54:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

deepwaterh

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 秦川萝卜头 at 2012-01-16 17:47:45:
假如我用A溶剂配,并且用A溶剂做参比,跟用B溶剂配,B溶剂做参比!在同一波长下测的吸光度一样吗?且最大吸收波长一样吗?谢谢!

一般来说,是不一样的
9楼2012-01-17 09:51:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秦川萝卜头

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by deepwaterh at 2012-01-17 09:51:10:
一般来说,是不一样的

溶剂不是用空白已经消除了吗?
只要努力,总会有结果的
10楼2012-01-17 10:06:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 秦川萝卜头 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600,321分求调剂 +7 大馋小子 2026-03-31 7/350 2026-03-31 18:02 by 无际的草原
[考研] 288资源与环境专硕求调剂,不限专业,有学上就行 +19 lllllos 2026-03-30 19/950 2026-03-31 16:48 by shengliu165
[考研] 315求调剂 +6 akie... 2026-03-28 7/350 2026-03-31 16:48 by asdfzly
[考研] 理学07化学 303求调剂 +8 睿08 2026-03-27 8/400 2026-03-31 16:31 by 690616278
[考研] 一志愿西交大080500材料学硕349 +5 jqx1258 2026-03-31 6/300 2026-03-31 16:16 by 记事本2026
[考研] 286求调剂 +6 Faune 2026-03-30 6/300 2026-03-31 14:37 by jp9609
[考研] 一志愿浙江大学工科动力工程370,数一121,专业课135,现在能去哪里 +3 080700调剂 2026-03-30 4/200 2026-03-31 12:00 by KLMY666
[考研] 320分,材料与化工专业,求调剂 +10 一定上岸aaa 2026-03-27 14/700 2026-03-31 10:47 by foria
[考研] 求调剂 +4 图鉴212 2026-03-30 4/200 2026-03-31 10:20 by cal0306
[考研] 求调剂 +4 研s. 2026-03-25 4/200 2026-03-31 10:05 by fmesaito
[考研] 吉大生物学326分求调剂 +3 sunnyupup 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:28 by longlotian
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工(085600)296求调剂 +25 稻妻小编 2026-03-26 25/1250 2026-03-30 20:11 by 滴滴上岸呀
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 16:05 by shuang5186
[考研] 295求调剂 +5 wei-5 2026-03-26 5/250 2026-03-30 08:34 by 探123
[考研] 349求调剂 +6 李木子啊哈哈 2026-03-25 6/300 2026-03-29 12:47 by 无际的草原
[考研] 316求调剂 +7 江辞666 2026-03-26 7/350 2026-03-28 21:28 by sanrepian
[考研] 070300求调剂306分 +4 26要上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-28 13:06 by 唐沐儿
[考研] 一志愿 西北大学 总分282 英语一62 求调剂 +7 18419759900 2026-03-25 8/400 2026-03-27 16:38 by 18419759900
[考研] 085600,材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
信息提示
请填处理意见