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酵母菌落PCR的方法
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snowrain0913
新虫
(初入文坛)
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(幼儿园)
金币: 1669.5
帖子: 46
在线: 13.5小时
虫号: 1235558
[交流]
酵母菌落PCR的方法
大家做酵母菌落PCR都是用什么方法呢?我是先将细胞在sds里97度煮十分钟,然后用水洗两次后加入PCR体系中。但是效果很差,有没有好的建议呢?
我的PCR程序是 95℃6min
95℃20s XX℃30s 72℃XXmin 30循环
72℃5Min
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1楼
2012-01-05 16:32:27
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snowrain0913(金币
+1
):谢谢参与
wanhscn(金币+3, 专家考核): ood! 2012-01-06 12:12:59
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
imyting
at 2012-01-05 17:14:24:
不需要煮吧,我做大肠杆菌是直接把菌液作为模板就可以了,我一直这么做的。酵母虽然是真菌,但是也不会有什么大的区别吧?
酵母细胞壁很厚,比较难破胞。我见有的实验室是加个裂解缓冲液,然后微波炉加热来破胞的。详情得打听下了。
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3楼
2012-01-05 17:25:38
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