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shiliushu44

金虫 (小有名气)

[交流] 细胞融合时，PEG的使用量

做单抗的同行们，你们细胞融合时，一个小鼠脾脏一般加入多少体积的PEG进行融合呢，我都是加入1ml，有时候感觉加入量太大了。加入量太大会造成怎样的后果呢？谢谢哈
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1楼 2012-01-02 20:16:33
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zhb1986free

金虫 (初入文坛)
★ ★
wenjing120: 金币+2, 鼓励交流！欢迎常来科研版！ 2012-03-23 09:32:54
一般为0.8ml.这个添加量的前提是在瘤细胞和脾细胞混合离心后，要将上面的培养基彻底的吸干，残留少许的培养基都会降低PEG的浓度从而影响融合的效果。PEG的作用过程最好不要超过两分钟，整个融合过程（包括后面的终止过程）最好不要超过十分钟。
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7楼2012-03-23 09:20:57
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齐颖颖

新虫 (初入文坛)
★ ★
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shiliushu44(金币+1): 2012-01-05 20:00:43
tuobaohua(金币+1): 积极应助 2012-01-06 08:37:57
我一般加0.8ML效果不错
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3楼2012-01-05 15:57:59
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zhangmu84

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wenjing120(金币+1): 鼓励新虫！欢迎常来科研版！ 2012-02-25 22:02:54
我们也就加0.8ML.关键是不要作用的时间太长
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4楼2012-02-25 19:43:40
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longqingci

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
tuobaohua(金币+2): 积极应助，欢迎常来科研版！ 2012-03-01 15:35:18
一般来说，书上都写的是0.8，但实际操作中，我们一般看免疫小鼠脾脏细胞的量。通常不计数，但如果目测细胞量较多，可以加入0.8，但对于8周龄左右小鼠，我推荐使用0.7.如果PEG加量多，会造成融合作用太强，融合的杂交瘤反而出出现死亡或者状态不良。建议0.7，作用时间从加入到终止控制在1分钟之内，若脾脏小，可继续降低用量。
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5楼2012-03-01 10:17:25
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