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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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shiliushu44

金虫 (小有名气)


[交流] 细胞融合时,PEG的使用量

做单抗的同行们,你们细胞融合时,一个小鼠脾脏一般加入多少体积的PEG进行融合呢,我都是加入1ml,有时候感觉加入量太大了。加入量太大会造成怎样的后果呢?谢谢哈

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齐颖颖

新虫 (初入文坛)


★ ★
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shiliushu44(金币+1): 2012-01-05 20:00:43
tuobaohua(金币+1): 积极应助 2012-01-06 08:37:57
我一般加0.8ML效果不错
3楼2012-01-05 15:57:59
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zhangmu84

新虫 (初入文坛)



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wenjing120(金币+1): 鼓励新虫!欢迎常来科研版! 2012-02-25 22:02:54
我们也就加0.8ML.关键是不要作用的时间太长
4楼2012-02-25 19:43:40
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longqingci

金虫 (小有名气)


★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
tuobaohua(金币+2): 积极应助,欢迎常来科研版! 2012-03-01 15:35:18
一般来说,书上都写的是0.8,但实际操作中,我们一般看免疫小鼠脾脏细胞的量。通常不计数,但如果目测细胞量较多,可以加入0.8,但对于8周龄左右小鼠,我推荐使用0.7.如果PEG加量多,会造成融合作用太强,融合的杂交瘤反而出出现死亡或者状态不良。建议0.7,作用时间从加入到终止控制在1分钟之内,若脾脏小,可继续降低用量。
5楼2012-03-01 10:17:25
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zhb1986free

金虫 (初入文坛)


★ ★
wenjing120: 金币+2, 鼓励交流!欢迎常来科研版! 2012-03-23 09:32:54
一般为0.8ml.这个添加量的前提是在瘤细胞和脾细胞混合离心后,要将上面的培养基彻底的吸干,残留少许的培养基都会降低PEG的浓度从而影响融合的效果。PEG的作用过程最好不要超过两分钟,整个融合过程(包括后面的终止过程)最好不要超过十分钟。
7楼2012-03-23 09:20:57
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chenyyy

无虫 (正式写手)



tuobaohua: 金币+1, 鼓励积极应助,欢迎常来科研经验版 2012-04-25 08:02:13
PEG 分子量越大,或浓度越高。对细胞毒性越大。。。50%的浓度吧
8楼2012-04-24 23:34:48
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目上人家

新虫 (初入文坛)


我是根据我的经验哈,你可以试一试,即用1个计时器,一根5ml的滴管,在1分钟内加50滴,边加边计数,做出来的效果很好。刚开始的时候可以多练习几次
9楼2012-04-28 13:20:44
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cuibaoliang

铁虫 (小有名气)


PEG宁少勿多!
10楼2012-11-01 16:41:00
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简单回复
2012-01-03 20:50  
祝福祝福
2012-03-01 13:44  
祝福
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