24小时热门版块排行榜    

查看: 3367  |  回复: 22
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

majunyang

银虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白纯化遇到问题

从野生菌里纯化不同蛋白酶组分,发酵液过阴离子柱,穿透峰里检测有酶活,7-56ms/cm电导下也有酶活,流速3ML/min,跑蛋白电泳不能确定是不是同一个组分,又过阳离子柱,还是出现在穿透峰里,洗脱峰居然没有,怎么回事??????谢谢!!
回复此楼
.。。。。。。。。。。。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

majunyang

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-01-06 08:29:51:
无论是阴阳离子交换层析柱都要求目的蛋白质的pI与所使用的pH体系相差1个单位,但对于自己从没有纯化过的一个蛋白质来说,pI是未知的,如果用粗酶来测定pI又不够准确。其实没必要测定pI,只要做一个预备实验就可以 ...

恩,应该是pH选择不当,我再提高pH一个单位试下。
.。。。。。。。。。。。
15楼2012-01-06 08:49:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 23 个回答

majunyang

银虫 (初入文坛)

注明下,阴离子和阳离子柱都是用的pH7.4缓冲液
.。。。。。。。。。。。
2楼2011-12-31 10:28:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
majunyang: 金币+1, 有帮助 2012-03-22 16:20:54
不知道你的目的蛋白的PH是多少啊,
3楼2011-12-31 16:44:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

majunyang

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by lihuan0525 at 2011-12-31 16:44:23:
不知道你的目的蛋白的PH是多少啊,

发酵液经硫酸铵沉淀后的沉淀溶于pH7.4缓冲液,不知等电点是多少
.。。。。。。。。。。。
4楼2011-12-31 20:05:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见