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chenlugb

木虫 (小有名气)

[交流] [求助]DNA提取的问题

我在DNA提取过程中,在加入酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)后离心总是出现混浊,离不下去,那位高手知道是怎么回事啊?

[ Last edited by telomerase on 2007-11-13 at 11:32 ]
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松虱

金虫 (正式写手)


telomerase(金币+1,VIP+0):谢谢分析!!
中间层出现浑浊是因为含有蛋白的缘故。在保证药品没有氧化变质的前提下。如果多次抽题都有沉淀的话,第一,可能你的样品量太多,而消化蛋白的药品不够。第二,研磨不够彻底,一定要磨细,要用力。  注意一下这两点 ,应该没错。不要贪多 ,多了反而裂解不充分,dna 无法释放出来。
20楼2007-06-19 17:53:20
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浪迹天涯

铜虫 (初入文坛)

可能是你的样品有其它杂质。
2楼2007-01-27 15:23:57
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无根萍

银虫 (小有名气)

请问你从什么材料中提取DNA? 这是因为不同材料含有的杂质不一样,因此才能给予你适当的解决办法。另外建议 你不凡把你的提取方案告诉大家,这样才有针对性的给予你的具体解决办法。
学术交流的联系方式: huangqingbeijing@yahoo.com.cn
4楼2007-01-27 16:08:53
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chenlugb

木虫 (小有名气)

我是用梨叶片做的,试剂没有问题,因为不是每个都出不来,是部分样品混浊,我用的CTAB提取法,方案就是先用液氮研磨叶片,加入预热的CTAB提取液2mL,混匀,65℃温浴30min,冷却至室温,5300rpm离心15min
5楼2007-01-27 19:09:36
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