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关于聚酰胺柱层析预处理的问题!急
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最近装了几次聚酰胺柱,发现流速很慢,洗脱不下来,据文献上讲是粉过细的原因.对聚酰胺的处理只是按说明上用乙醇冲洗至澄清,但有人说这样不行.想请问下各位高手,聚酰胺装柱前的预处理及洗脱中要注意哪些问题,经验资料均可,多谢啦!!! |
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 植化实验 |
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新买回来的聚酰胺处理大全（第一发帖鼓励一下，请求加金币）
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工业乙醇浸泡过夜后装柱，用3～4倍体积的工业乙醇洗涤，最后洗涤液水浴蒸干，待只有少量杂质后，2倍氢氧化钠的低浓度溶液洗涤，最后1倍量水洗，然后2～3倍10％的醋酸洗涤，最后用蒸馏水洗。 聚酰胺(Polyamide)是由酰胺聚合而成的一种高分子化合物，商品名：锦纶、尼龙。 锦纶中通常有两种杂质：一种是锦纶的聚合原料单体及其小分子聚合物。另一种是蜡质（锦纶丝再制成以后，表面涂有一层蜡）。这些杂质必须除去，否则原料单体及其小分子聚合物可与酚类物质形成复合物。蜡质能被醇液洗脱下来，与分离之物质混在一起则难以除去。 除去原料单体及其小分子聚合物的方法文献报道：用二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基甲酰胺：醋酸：水：乙醇（5：10：30：20）混合液洗脱。除去蜡质的方法文献报道：用甲醇：二氯乙烷（1：1）混合液洗脱。 建议较好的可行方法：取聚酰胺以90-95%乙醇浸泡，不断搅拌，除去气泡后装入柱中。用3-4倍体积的90-95%乙醇洗脱，洗至洗脱液透明并在蒸干后无残渣（或极少残渣）。再依次用2-2.5倍体积的5%NaOH水溶液、1倍体积的蒸馏水、2-2.5倍体积的10%醋酸水溶液洗脱，最后用蒸馏水洗脱至pH中性，备用。 用过的聚酰胺，一般用5%NaOH水溶液洗脱，洗至NaOH水溶液颜色极淡为止。有时因某些鞣质与聚酰胺又不可逆吸附，用NaOH水溶液很难洗脱，可用5%NaOH在柱中浸泡，每天将柱中的NaOH水溶液放出一次，并加入新的5%NaOH水溶液，这样浸泡一周后，鞣质可基本洗脱完。然后用蒸馏水洗脱至pH8-9，再用2倍量的10%醋酸水溶液洗脱，最后蒸馏水洗脱至pH中性，重复使用。  |
5楼2007-02-09 11:25:28
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可乐=枫(金币+2):感谢应助，欢迎常来药学版：）
可乐=枫(金币+2):感谢应助，欢迎常来药学版：）
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新买回来的聚酰胺有说明书的按说明书处理，没有说明书的看下面内容： 通常有两种杂质：一种是蜡质（锦纶丝再制成以后，表面涂有一层蜡）。这些杂质必须除去，否则原料单体及其小分子聚合物可与酚类物质形成复合物。蜡质能被醇液洗脱下来，与分离之物质混在一起则难以除去。 另一种是锦纶的聚合原料单体及其小分子聚合物除去原料单体及其小分子聚合物的方法文献报道：用二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基甲酰胺：醋酸：水：乙醇（5：10：30：20）混合液洗脱。除去蜡质的方法文献报道：用甲醇：二氯乙烷（1：1）混合液洗脱。 建议： 取聚酰胺以90-95%乙醇浸泡，不断搅拌，除去气泡后装入柱中。用3-4倍体积的90-95%乙醇洗脱，洗至洗脱液透明并在蒸干后无残渣（或极少残渣）。再依次用2-2.5倍体积的5%NaOH水溶液、1倍体积的蒸馏水、2-2.5倍体积的10%醋酸水溶液洗脱，最后用蒸馏水洗脱至pH中性，备用。  如果是比较细的比较慢是正常的，可以加压,用双联球就可以. |
2楼2007-01-26 12:59:57
3楼2007-01-27 15:50:05
chemrenn
木虫 (正式写手)
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4楼2007-02-03 18:59:09
