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关于聚酰胺柱层析预处理的问题!急
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最近装了几次聚酰胺柱,发现流速很慢,洗脱不下来,据文献上讲是粉过细的原因.对聚酰胺的处理只是按说明上用乙醇冲洗至澄清,但有人说这样不行.想请问下各位高手,聚酰胺装柱前的预处理及洗脱中要注意哪些问题,经验资料均可,多谢啦!!! |
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 植化实验 |
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可乐=枫(金币+2):感谢应助，欢迎常来药学版：）
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新买回来的聚酰胺有说明书的按说明书处理，没有说明书的看下面内容： 通常有两种杂质：一种是蜡质（锦纶丝再制成以后，表面涂有一层蜡）。这些杂质必须除去，否则原料单体及其小分子聚合物可与酚类物质形成复合物。蜡质能被醇液洗脱下来，与分离之物质混在一起则难以除去。 另一种是锦纶的聚合原料单体及其小分子聚合物除去原料单体及其小分子聚合物的方法文献报道：用二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基甲酰胺：醋酸：水：乙醇（5：10：30：20）混合液洗脱。除去蜡质的方法文献报道：用甲醇：二氯乙烷（1：1）混合液洗脱。 建议： 取聚酰胺以90-95%乙醇浸泡，不断搅拌，除去气泡后装入柱中。用3-4倍体积的90-95%乙醇洗脱，洗至洗脱液透明并在蒸干后无残渣（或极少残渣）。再依次用2-2.5倍体积的5%NaOH水溶液、1倍体积的蒸馏水、2-2.5倍体积的10%醋酸水溶液洗脱，最后用蒸馏水洗脱至pH中性，备用。  如果是比较细的比较慢是正常的，可以加压,用双联球就可以. |
2楼2007-01-26 12:59:57