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zhouxw1987

铁虫 (初入文坛)

[求助] 新手提RNA,电泳图看不懂

今天第一次提RNA,用普通琼脂糖凝胶1.6%,电压为180V,跑了电泳图,看不懂是啥意思,最下面那个很亮的地方是什么东西?是降解了么?但是又不像是拖带啊?请各位前辈指点指点,能用此RNA做反转录么?万分感谢!
 
图一、电泳5min时的图片
 
图二、电泳10min时的图片
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haiven

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 180V确实偏高了。测OD是好方法,本人现在都直接测OD省略电泳了。 2011-12-28 12:52:32
RNA电泳不宜跑太高的电压,毕竟不是PCR产物。这个在每个实验室都会有个经验值的,多问问,或者自己多摸索一下。
然后上样之前,对RNA定量一下,很方便的,用NanoDrop,1-2uL就可以了,同时还可以看出你的RNA的质量如何。这方面的资料很多了,你上网随便搜搜就找得到的。做实验之前,要把这些原理和方法多了解,然后设计和计划一下实验怎么做,这样实验的效率也就高多了。
走进你,温暖我,迷失于这个世界!
13楼2011-12-27 08:29:15
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我是小纯洁

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
只有5s 貌似全降解了~~~我感觉是。LS回答吧
2楼2011-12-25 20:48:10
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dnaxxx

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-12-26 11:42:29
西瓜: 回帖置顶 2011-12-28 12:49:31
西瓜(金币+3): Good! 2011-12-28 12:49:41
你这个提的不好,从上到下一次是28s, 18s 和5s,你的28s和18s条带很弱,基本上都是5s。不知道你想做什么实验,如果还有原材料再提一次吧,如果没有那就只好用这个来扩增你的目的基因了
3楼2011-12-26 07:09:40
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julietguo

银虫 (正式写手)

我最近一次提的RNA也是,反转录之后做PCR,得到的条带连100bp都不到,真怀疑是不是降解了
4楼2011-12-26 08:19:37
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