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符号解读
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查阅了很多文献，但是对以下符号还是不了解含义，请高手指教，谢谢！急！！在线等…… K-Ras 2lox/2lox;Cre+ ；K-Ras LSL/+;Cre+ ； K-Ras 2lox/+;Cre+ ；K-Ras LSL/LSL;Cre- ；K-Ras LSL/LSL;Cre+ ； K-Ras 2lox/2lox;Cre- |
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wanhscn(金币+6): 已退还10个金币，并给与6个金币奖励，感谢楼主及时反馈答案！ 2011-12-27 16:08:14
wanhscn: 回帖置顶 2011-12-27 16:11:34
wanhscn(金币+6): 已退还10个金币，并给与6个金币奖励，感谢楼主及时反馈答案！ 2011-12-27 16:08:14
wanhscn: 回帖置顶 2011-12-27 16:11:34
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自己最终找到答案了，跟大家分享一下 1. Cre(cyclic recombinase)重组酶：于1981年从P1噬菌体中发现，它 是一种位点特异性重组酶，不仅具有催化活性，而且与限制酶相似，能识别特异的 DNA 序列，即 loxP 位点，使 loxP位点间的基因序列被删除或重组。 2. LoxP（locus of X-over P1）序列：来源于P1噬菌体，由两个13bp反向重复序列和中间间隔的8bp序列共同组成。8bp的间隔序列确定了LoxP的方向，13bp的反向重复序列是Cre酶的结合域。 3. LSL：即loxP-STOP-loxP的简称，为一段固定的序列，插入基因后可阻止其下游基因如K-ras的转录翻译。 4.ras癌基因：参与人类肿瘤的发生发展。ras基因家族与人类肿瘤相关的基因有3种：h-ras 、k-ras 和n-ras， 分别定位于11、12和1号染色体上。各种ras基因具有相似的结构,均由四个外显子组成。它们的编码产物为相对分子质量2.1万的蛋白质,故称为P21蛋白，是一种膜结合型GTP/GDP结合蛋白，位于细胞膜内侧，在传递细胞生长分化信号方面起重要作用。k-ras的突变激活是人类多种肿瘤细胞恶性转化的主要原因之一， 有如分子开关， 正常时能控制调控细胞生长的路径；发生异常时则导致细胞持续生长。ras基因激活的方式有3种:基因点突变,基因大量表达,基因插入及转位. 5.Cre重组酶介导两个LoxP位点间的重组是一个动态、可逆的过程，可以分成三种情况： ①如果两个LoxP位点位于一条DNA链上，且方向相同，Cre重组酶能有效切除两个LoxP位点间的序列； ②如果两个LoxP位点位于一条DNA链上，但方向相反，Cre重组酶能导致两个LoxP位点间的序列倒位； ③如果两个LoxP位点分别位于两条不同的DNA链或染色体上，Cre酶能介导两条DNA链的交换或染色体易位。 动物的基因打靶一般采用第①种方法。 该题目意指在两个同向排列的loxP位点中间插入一段欲人为控制表达的基因k-ras序列，或将LSL置于k-ras序列上游，并将如此处理后的小鼠与其它表达Cre基因的小鼠杂交。获得k-ras 2lox/2lox或 k-ras LSL/LSL（纯合子）以及 k-ras 2lox/+或 k-ras LSL/+（杂合子）小鼠，而k-ras表达与否可以通过Cre酶的+/-调控。Cre作用与否需要相应配体的调控，如可以通过添加Tamoxifen诱导Cre表达，进而对loxP位点进行剪切。 由此，以上不同基因型小鼠，在Cre酶被诱导激活的情况下，可分别获得如下基因型小鼠，以用于临床研究相应表型。 K-Ras 2lox/2lox;Cre+ →K-Ras -/-；K-Ras LSL/+;Cre+ →K-Ras +/+； K-Ras 2lox/+;Cre+ →K-Ras -/+ ；K-Ras LSL/LSL;Cre- →K-Ras -/-； K-Ras LSL/LSL;Cre+ →K-Ras+/+ ；K-Ras 2lox/2lox;Cre- →K-Ras +/+ |
4楼2011-12-26 23:56:47
2楼2011-12-22 16:32:21
3楼2011-12-23 16:32:28
