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小丑鱼663

金虫 (小有名气)

虽然你着急求助,你也不应该说别人是 水贴.以后的回答是不是大家还得掂量下,帮不上你忙的都很水呢
21楼2012-07-26 11:30:25
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xiaoyanzi517

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

总是检测出类似于基因组的片段

该更换电泳液了...
偶时晴天偶时雨
22楼2012-07-26 12:40:40
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sd3824289

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

建议楼主这样做:做电泳检测的时候最好把你提取的DNA也一起检测,放在一个胶片上,至于PCR,可以做温度梯度来确定最适退火温度!PCR仪器上有设置温度梯度的功能的!
坚持,就像流星,即使知道最后的结果,也要勇敢的走到最后!
23楼2012-07-28 11:41:05
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jackiey2

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

建议:
1.提出来的DNA模版先跑电泳,看有没有条带
2.用别人用的成熟的引物和体系PCR你的模版,看有没有条带
另外LZ说的应该是Tm58℃。用55℃大多数都能P的出来的。
遗传
24楼2012-07-28 13:57:53
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uneei

金虫 (小有名气)

引用回帖:
21楼: Originally posted by 小丑鱼663 at 2012-07-26 11:30:25
虽然你着急求助,你也不应该说别人是 水贴.以后的回答是不是大家还得掂量下,帮不上你忙的都很水呢

说水贴的那个人,不是楼主啦~~
25楼2012-07-28 20:23:22
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jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

你的每个泳道的最上面的条带是什么东东?!怎么每个都有?你这跑的不是基因组吧?是你的阐述不清楚还是我的理解力太差
26楼2012-07-28 21:19:49
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Oracle_

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

后面的条带不是什么“类似基因组“的条带,换电泳液就没有了,没有目的条带,甚至杂带都看不到。做的相当有问题,请从引物、模板、温度梯度等方面着手
27楼2013-12-13 11:04:12
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

模板量太大。主要问题是你确定里面有目的DNA模板吗?
28楼2013-12-14 12:33:35
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tjufeixiang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by doudouxiong at 2011-12-20 10:04:43
做梯度的时候有的,可是再换模板的时候的确是扩不出来或者是就上述情况,现在导师不愿意换其他的提取DNA的方法什么的。那个温度的意思是引物订的时候说明书上的温度是58.6,我实际操作的时候感觉温度有点高,而且P ...

做完梯度后,更换模板,可能会有影响的。建议换模板后再做次梯度
29楼2013-12-14 16:43:40
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