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小丑鱼663

金虫 (小有名气)
虽然你着急求助,你也不应该说别人是 水贴.以后的回答是不是大家还得掂量下,帮不上你忙的都很水呢
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21楼2012-07-26 11:30:25
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xiaoyanzi517

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

总是检测出类似于基因组的片段

该更换电泳液了...
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偶时晴天偶时雨
22楼2012-07-26 12:40:40
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sd3824289

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

建议楼主这样做：做电泳检测的时候最好把你提取的DNA也一起检测，放在一个胶片上，至于PCR，可以做温度梯度来确定最适退火温度！PCR仪器上有设置温度梯度的功能的！
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坚持，就像流星，即使知道最后的结果，也要勇敢的走到最后！
23楼2012-07-28 11:41:05
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jackiey2

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

建议：
1.提出来的DNA模版先跑电泳，看有没有条带
2.用别人用的成熟的引物和体系PCR你的模版，看有没有条带
另外LZ说的应该是Tm58℃。用55℃大多数都能P的出来的。
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遗传
24楼2012-07-28 13:57:53
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uneei

金虫 (小有名气)
引用回帖:
21楼: Originally posted by 小丑鱼663 at 2012-07-26 11:30:25
虽然你着急求助,你也不应该说别人是 水贴.以后的回答是不是大家还得掂量下,帮不上你忙的都很水呢

说水贴的那个人，不是楼主啦~~
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25楼2012-07-28 20:23:22
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你的每个泳道的最上面的条带是什么东东？！怎么每个都有？你这跑的不是基因组吧？是你的阐述不清楚还是我的理解力太差
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26楼2012-07-28 21:19:49
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Oracle_

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

后面的条带不是什么“类似基因组“的条带，换电泳液就没有了，没有目的条带，甚至杂带都看不到。做的相当有问题，请从引物、模板、温度梯度等方面着手
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27楼2013-12-13 11:04:12
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

模板量太大。主要问题是你确定里面有目的DNA模板吗？
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28楼2013-12-14 12:33:35
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tjufeixiang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by doudouxiong at 2011-12-20 10:04:43
做梯度的时候有的，可是再换模板的时候的确是扩不出来或者是就上述情况，现在导师不愿意换其他的提取DNA的方法什么的。那个温度的意思是引物订的时候说明书上的温度是58.6，我实际操作的时候感觉温度有点高，而且P ...

做完梯度后，更换模板，可能会有影响的。建议换模板后再做次梯度
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29楼2013-12-14 16:43:40
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