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汕头大学海洋科学接受调剂
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cshb1983

银虫 (小有名气)

[求助] 请教C18柱层析问题!!!!

C18这个填料承载量是多少?比如说我装了200g的填料,样品上样量可以是多少呢?我看网上说30:1,难道意思是200g样品上样量7g? 一般用什么流动相洗脱为宜?
我现在柱子是2.6*90cm,用80%甲醇洗脱,是不是必须用梯度洗脱呢?我现在流速是3ml/min,这流速是不是有点快了?
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成功成仁
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cshb1983

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小药虫 at 2011-12-16 10:36:11:
这个和待分离组分的溶解度有关,没有一个标准,200g 硅胶建议加压 先上1-2g样品看看。用等度,速度不是问题!

我样品先用纯甲醇溶了,然后采用80%甲醇洗脱的,甲醇浓度低了不溶。您有碰到样品在低浓度甲醇溶剂中不溶的情况吗?一般碰到这个情况怎么办?
这两个图是我今天刚分离的图和液相图,上图是我用C18反相柱80%甲醇洗脱的洗脱曲线,下图是我用液相分析得到的图。C18反相柱层析后面那一堆的东西是没分开吗?该怎么处理,请教一下,谢谢!


成功成仁
4楼2011-12-16 15:08:32
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小药虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-12-16 12:38:22
cshb1983(金币+1): 2011-12-16 15:12:02
这个和待分离组分的溶解度有关,没有一个标准,200g 硅胶建议加压 先上1-2g样品看看。用等度,速度不是问题!
2楼2011-12-16 10:36:11
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小药虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

补充:我们1kg的轴向加压柱好几个产品才上0.5-1g样品!再多点就分离度不好了!
3楼2011-12-16 10:38:45
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HESENSE

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

C18的上样没这么大,肯定分离效果不好呢.你应该控制比例,另外就是极性条件.才能出好结果.
6楼2012-05-28 10:26:48
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