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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 请教C18柱层析问题！！！！
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cshb1983

银虫 (小有名气)

[求助] 请教C18柱层析问题！！！！

C18这个填料承载量是多少？比如说我装了200g的填料，样品上样量可以是多少呢？我看网上说30:1，难道意思是200g样品上样量7g? 一般用什么流动相洗脱为宜？
我现在柱子是2.6*90cm，用80%甲醇洗脱，是不是必须用梯度洗脱呢？我现在流速是3ml/min，这流速是不是有点快了？
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成功成仁
1楼 2011-12-16 10:17:15
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cshb1983

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小药虫 at 2011-12-16 10:36:11:
这个和待分离组分的溶解度有关，没有一个标准，200g 硅胶建议加压 先上1-2g样品看看。用等度，速度不是问题！

我样品先用纯甲醇溶了，然后采用80%甲醇洗脱的，甲醇浓度低了不溶。您有碰到样品在低浓度甲醇溶剂中不溶的情况吗？一般碰到这个情况怎么办？
这两个图是我今天刚分离的图和液相图，上图是我用C18反相柱80%甲醇洗脱的洗脱曲线，下图是我用液相分析得到的图。C18反相柱层析后面那一堆的东西是没分开吗？该怎么处理，请教一下，谢谢！
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成功成仁
4楼2011-12-16 15:08:32
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小药虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-12-16 12:38:22
cshb1983(金币+1): 2011-12-16 15:12:02
这个和待分离组分的溶解度有关，没有一个标准，200g 硅胶建议加压 先上1-2g样品看看。用等度，速度不是问题！
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2楼2011-12-16 10:36:11
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小药虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

补充：我们1kg的轴向加压柱好几个产品才上0.5-1g样品！再多点就分离度不好了！
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3楼2011-12-16 10:38:45
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HESENSE

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

C18的上样没这么大,肯定分离效果不好呢.你应该控制比例,另外就是极性条件.才能出好结果.
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6楼2012-05-28 10:26:48
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