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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于细菌保藏的问题
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scp1988

木虫 (小有名气)

[求助] 关于细菌保藏的问题

细菌用试管放置于-4度的冰箱保藏，一个月后需要接种一次，问具体如何操作，直接从试管接种到另一个试管还是接种到培养基后在接种到试管，菌种用时怎么复活，直接用吗？
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1楼 2011-12-15 19:24:39
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

匿名

用户注销 (正式写手)
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2楼2011-12-15 19:46:48
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wanyifei0123

铜虫 (初入文坛)
重要的菌种一定要在-70℃保存一批；我们非常重要的工程菌株都会分为很多小管在液氮中冻存。斜面容易退化，这点要注意，定期要对斜面培养物进行活化检测——我就遇到过斜面传代大半年就出现菌种退化无法表达特定蛋白的情况。对退化的斜面培养物进行复壮也是不错的选择。
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10楼2011-12-16 23:34:27
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普通回帖

毛桃就是我

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
接种传代直接挑取母钟划线到新的斜面上，菌种用的时候当然要活化了，可在斜面或平板上活化。
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木有签名呀！
3楼2011-12-15 19:56:43
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hong_31

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
细菌斜面一般保藏在4度冰箱中就可以了，斜面一个月传代一次，要使用时要通过传代活化菌种。
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tobeabetterman
4楼2011-12-15 23:56:32
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scp1988

木虫 (小有名气)
谢谢 我想知道具体的传代操作
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5楼2011-12-16 00:08:36
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痴客

木虫 (正式写手)

吃货250

【答案】应助回帖

★
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zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-12-16 14:37:24
scp1988(金币+5): 很感谢 2011-12-16 23:22:59
首先，试管斜面应该是放在4°保藏；传代的时候直接取斜面培养物接种到新鲜的斜面上，然后放到恒温培养箱培养1d或2d，然后继续放到4°保藏。
关于菌种活化的问题，从斜面取培养物接种到新鲜的平板培养基上，培养1d或更长，然后基本上可以使用了
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因为这个世界上这么多的狼，我这只牧羊犬只好放弃我的温顺，向着这个世界放出最耀眼的光。
6楼2011-12-16 10:42:05
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秋水流连

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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从冰箱的斜面直接挑取一环，划线在新制备的斜面上，然后将斜面在合适的温度培养一定时间，不同菌种时间不同，一般要培养使菌体超过对数期。
斜面转接的时间也会因菌而宜。
冰箱的斜面拿出来用，需要活化，发酵上一般转入装有培养液的三角瓶中摇一夜做为一级种子。
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7楼2011-12-16 16:10:21
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sp1613

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
从原来的斜面上挑一点菌接种在新的斜面上，按照细菌的生长条件培养，长好后再放4度保存
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8楼2011-12-16 17:41:58
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含笑天天

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以从一个试管直接接种到另一个试管，再培养，放置就ok了。菌种复活时，接种到液体或者固体培养基上培养做种子液，再用。
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虫虫虫虫
9楼2011-12-16 20:26:25
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