24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 5021  |  回复: 32
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

棒哈哈

铁虫 (小有名气)

[求助] 基因组DNA提取问题

大家好,我是做真菌研究的,在提取基因组DNA时遇到一个问题,能力有限,实在是解决不了,可是实验不能等啊,请有经验,有能力的虫友帮我解决一下,谢谢了!!
    我是用液氮研磨菌丝,氯化苄法提取的DNA,提取完之后用200 uL TE buffer溶解(完全溶解)然后用10 uLRNA酶消化过夜,结果跑电泳(见图一),然后我又用TE buffer 稀释5倍后,再跑电泳,结果(见图二),后面加大了RNA酶的量,还是同样出现这种情况,无语了,请问这是为什么?
我的问题是:DNA用TE 完全溶解后(肉眼观察是完全溶解了的)跑电泳,上面没有目的条带,下面有一团亮带,再用TE稀释5倍后,结果上面出现了很明显的目的条带,下面就基本上没有了,请问这是为什么??

图一



图二

[ Last edited by 1949stone on 2011-12-14 at 11:33 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ma_xiaowen

木虫 (正式写手)

送鲜花一朵
你好,看了你关于真菌基因组的贴子,我发现我最近也遇到了类似的情况,我是用的CTAB法,加后抽提了两次,溶入水或TE都是20uL,再加入1ul的RNase 消解一个小时左右,0.8%的胶检测,就是没有条带出现,反而在RNA条带处出现亮团,而测OD时,核酸浓度也还行,OD260/280  1.8~1.9左右,然后 OD260/230 1.3~1.5 想问问你怎么去解决这个问题,谢谢了啊
30楼2012-03-02 14:36:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 33 个回答

棒哈哈

铁虫 (小有名气)

怎么还是没有消息啊!!!!!!!
2楼2011-12-13 16:20:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

棒哈哈

铁虫 (小有名气)

西瓜: 回帖置顶 2011-12-13 19:01:04
不好意思, 我表达能力太差了!
我的问题是:DNA用TE 完全溶解后(肉眼观察是完全溶解了的)跑电泳,上面没有目的条带,下面有一团亮带,再用TE稀释5倍后,结果上面出现了很明显的目的条带,下面就基本上没有了,请问这是为什么??
4楼2011-12-13 17:40:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

棒哈哈

铁虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by shaoriyan at 2011-12-13 16:47:56:
看不到图片

你好,我补充了问题,图片我这是显示的,不知道为什么,请您再看一次吧,谢谢回复!
5楼2011-12-13 17:42:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物学调剂 +10 纸扇zhishan 2026-04-13 10/500 2026-04-18 21:19 by zqndavala
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 297,工科调剂? +5 河南农业大学-能 2026-04-14 5/250 2026-04-18 15:17 by Equinoxhua
[考博] 求博导|生物质基多孔碳/超级电容方向,已有相关成果,寻能源材料/碳材料方向老师 +3 猪猪人Zzz 2026-04-12 3/150 2026-04-17 19:10 by 阳阳阳^_^
[考研] 0854求调剂 +21 门路摸摸 2026-04-15 25/1250 2026-04-17 15:45 by qzxyhcsy
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀,最好在一个月之内的,研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 5/250 2026-04-17 10:02 by bobvan
[考研] 294求调剂 +14 淡然654321 2026-04-15 14/700 2026-04-16 21:01 by lpl364211
[考研] 322求调剂 +8 123安康 2026-04-12 15/750 2026-04-16 11:07 by Espannnnnol
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +4 白云123456789 2026-04-13 4/200 2026-04-16 00:18 by 粉沁若尘
[考研] 一志愿A区211,22408 321求调剂 +6 随心所欲☆ 2026-04-15 7/350 2026-04-15 21:45 by lbsjt
[考研] 085404 22408 309分求调剂 +9 lzmk 2026-04-14 10/500 2026-04-15 20:02 by 学员JpLReM
[考研] 0854调剂 +13 长弓傲 2026-04-12 16/800 2026-04-15 13:45 by fenglj492
[考研] 105500药学求调剂 +4 x_skys 2026-04-12 4/200 2026-04-14 13:37 by rndfc
[考研] 考研英一数一338分 +9 长江大学东校区 2026-04-13 10/500 2026-04-14 00:41 by 王珺璞
[考研] B区0809 ,数一英一,290 求调剂 +3 泠潍1111 2026-04-12 4/200 2026-04-13 20:35 by 学员JpLReM
[考研] 302求调剂 +10 易!? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
[考研] 297工科,求调剂? +13 河南农业大学-能 2026-04-12 13/650 2026-04-13 14:12 by dingyanbo1
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +13 drizzle_9 2026-04-12 14/700 2026-04-13 10:26 by Faiz5552
[考研] +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
[考研] 346分,工科0854求调剂,专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
信息提示
请填处理意见