| 查看: 568 | 回复: 5 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
pcr
|
||
| pcr扩增一段序列 这段序列中有一段连续重复的GCCTCC 扩增产物拿去测序比对 发现少了一个GCCTCC 有可能是pcr扩增过程中出现问题了吗？ |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有256人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有3人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
3楼2011-12-13 09:38:37
cdl007
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 41
- 应助: 46 (小学生)
- 贵宾: 0.025
- 金币: 2570.6
- 红花: 11
- 帖子: 545
- 在线: 123.1小时
- 虫号: 275133
- 注册: 2006-08-27
- 专业: 肿瘤病因
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+3): 鼓励积极应助！ 2011-12-12 18:19:28
zds2257(金币+2): 引物结合位点没错 其他地方扩增也没什么错误 看来序列本来就这样 不过现在正在验证 2011-12-12 23:28:16
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+3): 鼓励积极应助！ 2011-12-12 18:19:28
zds2257(金币+2): 引物结合位点没错 其他地方扩增也没什么错误 看来序列本来就这样 不过现在正在验证 2011-12-12 23:28:16
|
PCR反应是个概率事件 引物特异性结合在互补位置，但是也有可能结合在其他位置，这跟引物设计中的G自由能相关。 同时，taq酶的突变率1/1000,如果太长的序列，有错配是正常的， 但是楼主的序列正好差gcctcc，taq酶的突变不会这样， 建议楼主重新pcr，测序，或者多做几个孔，同时测序， 如果还有问题可以试试提高退火温度，或者重新设计一下上下游引物 |
2楼2011-12-12 13:21:30
4楼2012-01-14 11:56:30
wangdunzju
新虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 281.9
- 散金: 5
- 红花: 1
- 帖子: 82
- 在线: 13.9小时
- 虫号: 1087999
- 注册: 2010-09-03
- 专业: 植物学研究的新技术、新方
6楼2012-01-17 16:44:42