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nestzhao

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by wx1119 at 2011-12-12 19:56:20:
我的测序结果也遇到过,不过没关系的没有影响!

没影响??什么意思??
给力2011
11楼2011-12-12 22:42:16
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wx1119

铜虫 (小有名气)

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西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-12-13 18:29:37
比对的结果没什么影响,我的样品室长度为1200,之前在华大测的,后来在宝生物测,两个结果在ncbi上比对的结果一样。我的一个建议,你可以再考虑一下。
12楼2011-12-13 00:26:41
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dnaxxx

至尊木虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
nestzhao(金币+1): 2011-12-13 09:16:40
引物区有突变当时是公司合成时导致的了
13楼2011-12-13 07:36:20
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cloverplm

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+3): Good! 2011-12-14 16:07:47
nestzhao(金币+1): 2011-12-14 22:42:49
引用回帖:
7楼: Originally posted by nestzhao at 2011-12-12 08:45:33:
我不知道怎样才叫测序效果好,但我看过他的峰图,每个峰的分离效果还是不错的,没有重叠什么的

A good sequencing results cover the following traits:
1) The map of sequencing is continuous  
2) All peaks are sharp   
3) The background is very low   
4) No double peak appeared
净——静——竞——进
14楼2011-12-13 21:22:57
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luckyhongli

金虫 (小有名气)

★ ★
mengfei8336(金币+2): 谢谢您对小木虫的关注~ 2011-12-13 21:41:46
这个问题我也遇到过,测序发现引物中间的序列(限制性内切酶位点的前面)多一个碱基,测序峰无任何问题,那么就只有可能是引物合成有问题,质问引物合成公司,公司陪不是,重新合成,再做,OK。
  所以最好问引物合成公司重新合成。祝好运!
请相信坚持的力量
15楼2011-12-13 21:34:56
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中国药人

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


西瓜: 回帖置顶 2011-12-14 16:08:56
西瓜(金币+1): 鼓励反馈!普通Taq酶的错误率有1/1000,做克隆时最好选用高保真酶,如Pfu酶或者混合酶等。 2011-12-14 16:14:06
引用回帖:
10楼: Originally posted by nestzhao at 2011-12-12 22:41:51:
后来怎么处理的啊?重新选克隆送样测序??

我选了三个克隆啊,测序另外三个都没有问题,只有一个的引物处的酶酶切位点少了一个碱基,而且这个克隆提的质粒双酶切切出的目的片段电泳图比别的克隆大,所以可以肯定是Taq酶有问题。
有容德乃大,无求品自高。
16楼2011-12-14 00:42:16
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syn1985

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
测序的时候刚开始的那一段碱基会读不准的
17楼2011-12-14 17:07:55
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