24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 998  |  回复: 5

puguilin

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沾欢欢

金虫 (正式写手)

啦啦啦


【答案】应助回帖

puguilin(金币+1): 2011-12-08 18:55:47
个人感觉还是找文献里现成的引物吧,自己设计的很多都不靠谱
2楼2011-12-08 13:37:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

P都P不出来肯定有问题了。cDNA质量有检测过吗?可以扩增一下内参基因(actin等,可以从文献找)。如果内参基因都扩增不出来,显然是cDNA不好,原因很多,比价可能的是RNA质量不好。
引物自己设计没问题的,当然前提是你会设计。我就见过文献里面的引物很烂的。
3楼2011-12-08 19:12:39
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccharlien

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-12-08 19:12:39:
P都P不出来肯定有问题了。cDNA质量有检测过吗?可以扩增一下内参基因(actin等,可以从文献找)。如果内参基因都扩增不出来,显然是cDNA不好,原因很多,比价可能的是RNA质量不好。
引物自己设计没问题的,当然前 ...

文献里的引物烂并不一定是作者水平不行
很大可能是发文章的时候有意写一个效果不那么好的引物序列
4楼2011-12-08 20:50:21
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ccharlien at 2011-12-08 20:50:21:
文献里的引物烂并不一定是作者水平不行
很大可能是发文章的时候有意写一个效果不那么好的引物序列

这个是有可能。还有可能是作者这方面的技术不好。当然,不影响文章质量就是了。不过我碰到的那个情况是内参的引物,这个倒是没必要使绊子。
以前也见过我师兄写文章,他老板把产量故意写低了1/3,关键的技术部分也做了模糊处理,理由是他们以后准备投产,暂时要低调
5楼2011-12-08 21:39:04
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忘忧草_

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引物比较关键,设计的引物位于内含子部分是扩不出目的片段的,建议引物设计以mRNA为模板;引物的退火和延伸比较严格吧,尽量和内参的一致;内参扩得的片段大小要了解,目的片段要尽量接近内参所扩片段。个人心得,仅供参考
不将就
6楼2011-12-08 22:12:33
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 puguilin 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 恳请有学校收留 +6 柯淮然 2026-04-12 6/300 2026-04-16 07:23 by 学员JpLReM
[考研] 求调剂 +11 小聂爱学习 2026-04-11 15/750 2026-04-15 21:57 by noqvsozv
[考博] 26年电池方向博士申请 10+3 15615939259 2026-04-09 4/200 2026-04-15 14:22 by kwansei
[考研] 药学305求调剂 +7 玛卡巴卡boom 2026-04-11 7/350 2026-04-15 13:21 by 西北望—风沙
[考研] 279学硕食品专业求调剂院校 20+6 孤独的狼爱吃羊 2026-04-12 28/1400 2026-04-14 15:44 by zs92450
[考研] 279求调剂 +12 张番茄不炒蛋 2026-04-11 12/600 2026-04-14 15:38 by zs92450
[考研] 农学0904 312求调剂 +4 Say Never 2026-04-11 4/200 2026-04-14 09:10 by zs92450
[考研] 考研求调剂 +12 子木呐 2026-04-12 13/650 2026-04-14 01:19 by 王珺璞
[考研] 0856专硕求调剂 希望是a区院校 +24 好好休息好不好 2026-04-09 27/1350 2026-04-13 22:22 by pies112
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +9 求上岸的小王 2026-04-10 9/450 2026-04-13 16:08 by jiangguiquan11
[考研] 生物学调剂,一志愿西南大学348,Top期刊一区二作、二区三作,三等奖学金三次 +5 candyyyi 2026-04-09 5/250 2026-04-13 09:02 by 可淡不可忘
[考研] 291求调剂 +8 关忆北. 2026-04-11 8/400 2026-04-12 09:32 by 逆水乘风
[考研] 085410 273分调剂 +4 X1999 2026-04-09 4/200 2026-04-11 13:05 by pies112
[考研] 0859,337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 11:34 by caotw2020
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +16 叶zilin 2026-04-10 16/800 2026-04-11 11:04 by may_新宇
[考研] 工科273调剂 +6 X1999 2026-04-09 7/350 2026-04-11 10:23 by zhq0425
[考研] 调剂 化学 307 +21 73372112 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 23:53 by wj165256
[考研] 284求调剂 +9 让我上岸吧阿西 2026-04-09 11/550 2026-04-10 19:18 by 靖jing
[考研] 085601初试330分找调剂 +10 流心奶黄包l 2026-04-09 10/500 2026-04-10 08:14 by Sammy2
[考研] 083200 初试305分 求调剂 暂不考虑跨专业 +15 Claireyyyy 2026-04-09 15/750 2026-04-09 16:11 by zhuimr
信息提示
请填处理意见