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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Bio-rad蛋白电泳的问题请教，有图，希望有经验者多多指教！
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wuzhq

铁杆木虫 (正式写手)
★
wanhscn(金币+1): 有道理！ 2011-12-03 08:47:09
上样缓冲液问题
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11楼2011-12-03 08:19:18
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carot

金虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by wanhscn at 2011-12-02 22:40:51:
有的时候 上样buffer中蔗糖多了,会在底部将带压成一道线!

buffer里没有蔗糖的
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12楼2011-12-03 08:21:15
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
引用回帖:
12楼: Originally posted by carot at 2011-12-03 08:21:15:
buffer里没有蔗糖的

甘油加多了
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真相是最大的奢侈品
13楼2011-12-03 08:42:36
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carot

金虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by wanhscn at 2011-12-03 08:42:36:
甘油加多了

每毫升上样缓冲液中加了0.25ml 100%甘油（100g甘油+20ml水），配的是5*的上样缓冲液
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14楼2011-12-03 09:00:28
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
★
西瓜(金币+1): 有经验！ 2011-12-03 22:21:42
引用回帖:
14楼: Originally posted by carot at 2011-12-03 09:00:28:
每毫升上样缓冲液中加了0.25ml 100%甘油（100g甘油+20ml水），配的是5*的上样缓冲液

上样缓冲液中甘油加多了，点样的时候是好点，但是多了容易产生这种情况，跑DNA和蛋白都容易出现。你这个可以少加点！
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真相是最大的奢侈品
15楼2011-12-03 09:06:20
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0624410024

金虫 (正式写手)

Begging for knowledge
引用回帖:
10楼: Originally posted by carot at 2011-12-03 08:19:07:
是放在冰水里电泳的 但是电泳时间很长 感觉蛋白跑不下去的样子 蛋白是脱盐后上的样 所以应该不是盐浓度的问题 所以就很郁闷

你的Marker也是这样的，所以问题是你的胶出了问题，或者是你的缓冲液的问题哈，是因为外部环境或者外部条件影响的哈！
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每天坚持多一点，以后困难少一点！
16楼2011-12-03 10:03:49
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杨正坤

铁杆木虫 (著名写手)
有可能是制备的胶有点硬了，你可以制备个浓度低点的看看！
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17楼2011-12-03 13:26:24
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AnkeyGO

铁虫 (初入文坛)
★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励 2011-12-03 22:22:02
请问楼主是不是加样的时候把样品加到孔外了呢？我们试过加样的时候把样品加到空外后蛋白质就会聚集到底部形成很厚的条带。
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18楼2011-12-03 14:54:13
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acehanhan

金虫 (小有名气)
★
西瓜(金币+1): AP也有可能 2011-12-03 22:22:11
好像是TEMED的问题，最好不要用一年以上的TEMED.
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19楼2011-12-03 20:28:08
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flemingo

金虫 (小有名气)
凭感觉应该是缓冲液的问题
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20楼2011-12-04 12:07:29
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