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hellen1987

木虫 (小有名气)


[交流] 酶在80℃热水处理 变性的问题

我是研究在某一温度下蛋白质变性程度以及空间结构的变化问题,酶在80℃热水中处理5min,时间要求很精确,处理结束是应该马上放冰浴中?还是放4℃冰箱中降温?
想要有速度的话肯定是冰浴快,但是在高温下马上再低温处理,蛋白质结构会不会生改变?而如果4℃降温,肯定很慢,这样又会发生时间依赖性酶活性的丧失。。。
不知大家试验中会如何处理这个问题?刚开始做实验,请多加指教~·~
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木虫 (著名写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
hellen1987(金币+10): 恩 谢谢 很有启发 2011-12-06 08:45:58
立即冰水浴吧,放冰箱的做法,别人重复不了,谁知道你的冰箱距离水浴锅多远!精确是相对而言的,能精确的是放到80度水浴的时间.放入前是在冰浴还是室温,可以写.达到80度是需要时间的,跟样品的温度,体积和试管的材质厚度有一定影响.试验的做法和描述只要更方便别人理解和重复你的试验就可以了.
5楼2011-12-03 09:38:55
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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
hellen1987(金币+5): 恩 谢谢 马上检测确实不容易 现在我是觉得放在化了的冰水里可能比较现实 2011-12-01 09:06:24
个人认为,如果可能,最好高温处理之后马上检测。
本人外行,权当顶贴吧~
2楼2011-11-29 23:33:45
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神以灵

木虫 (正式写手)


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+1): good 2011-11-30 04:08:43
hellen1987(金币+5): 是应该再看一些影响蛋白质构象相关的文献 谢谢了! 2011-12-01 09:08:12
测定温度一定要室温吗
如果一定要室温
那两种都试一下 看看结果差多少
我也没搞过
不敢说
你可以查一下文献
看看冰水浴是否真的会产生你说的那种负面效果
因为不同的酶应该不一样

[ Last edited by 神以灵 on 2011-11-29 at 23:58 ]
3楼2011-11-29 23:57:11
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547star

木虫 (著名写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
补充一下,因为要测构象变化,这方面不懂.建议仔细阅读参考文献,看明白别人怎么做,在充分理解的情况下,然后自己照着做,条件不具备的,才适当的修改.
6楼2011-12-06 09:34:50
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